Determinación de vitamina C:
El ácido ascórbico o vitamina C (C6H8O6) se puede determinar por medio de una titulación yodométrica. La vitamina C es un agente reductor suave que reacciona rápidamente con el ión triyoduro, en esta práctica se genera un exceso conocido de ion triyoduro (I3
- ) por reacción de yodato con yoduro, se deja reaccionar y luego el exceso de I3
- se titula por retroceso con una solución de tiosulfato. El método se basa en las siguientes reacciones:
8I- + IO3- + 6H+____ 3I3- + 3H2O

C6H8O6 + I3- + H2O _______ C6H8O7 + 2H+ + 3I
Ácido
ascórbico ácido deshidroascórbico

I3- + 2(S2O3)-2 ______ 3I- + (S4O6)-2
Tiosulfato tetrationato
Materiales por grupo de laboratorio:
· Tres erlenmeyer de 250ml
· un …ver más…

La absorbancia se mide de forma continua transcurridos 7 minutos. El antioxidante sintético de referencia, Trolox, se ensaya a una concentración de 0-15 μM (concentración final) en etanol, en las mismas condiciones, lo que se hace también con ácido ascórbico (0-20 mg/100 mL). Los resultados se expresan en TEAC (actividad antioxidante equivalente a Trolox) y en VCEAC (actividad antioxidante equivalente a vitamina C), en este último caso por tratarse de alimentos.
2.4.2 - Método DPPH
Este método, desarrollado por BRAND-WILLAMS et al.[6], se basa en la reducción de la absorbancia medida a 515 nm del radical DPPH•, por antioxidantes. Con modificaciones el método descrito por KIM et al.[23], se basa en la medida de la absorbancia del radical DPPH• 100 μM (3,9 mL) disuelto en metanol al 80%, a la longitud de onda de 517 nm. Se añade 0,1 mL de la muestra o patrón, la mezcla se homogeniza cuidadosamente, y se mantiene en la oscuridad durante 30 minutos. Las medidas de absorbancia a 517 nm se realizan antes de añadir la muestra (A0) y pasados los 30 y 60 minutos (Af). La concentración de DPPH• en el medio de reacción se calcula a partir de una curva de calibrado obtenida por regresión lineal. Los resultados se expresan en TEAC, o sea, actividad equivalente a Trolox (μM/g de muestra peso fresco). El antioxidante sintético de referencia Trolox, a una concentración de