Universidad Nacional de Trujillo
FACULTAD DE INGENIERIA QUÍMICA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ING. AMBIENTAL

CURSO

: Bioquímica experimental

DOCENTE

: Salazar Castillo, Marco

ALUMNO

: Guevara Neyra, Jhonny

CICLO

:
VI

TRUJILLO-PERÚ
2013

Ejercicio 02.
La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilinasa (también conocida como β – lactamasa), un enzima presente en algunas bacterias resistentes. La masa de este enzima en staphylococus aureus es de 29.6 Kd. La cantidad de penicilina hidrolizada en un minuto en una disolución de 10 mL que contiene 109 g de penicilinasa purificada se midió como función de la concentración de penicilina. Supóngase que la concentración de penicilina no cambia apreciablemente durante …ver más…

Velocidad (µmol/min)
Sin inhibidor con inhibidor
10.4
4.1
14.5
6.4
22.5
11.3
33.8
22.6
40.5
33.8

[S]
0.3 × 10-5 M
0.5 × 10-5 M
1.0 × 10-5 M
3.0 × 10-5 M
9.0 × 10-5 M

Resolución.
(a) ¿Cuáles son los valores de Vmax y KM en ausencia de inhibidor? ¿y en su presencia? En ausencia del inhibidor.
Graficamos V0 contra [S] y obtenemos la siguiente gráfica:

V0

Grafico Nº 01. V0 VS [S]
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
0

20

40

[S]

60

80

100

Con lo que no se puede obtener valores certeros de Vmax y Km, por lo que transformamos en una función lineal y obtenemos la representación de
Lineweaber - Burk (o de dobles inversos).

1/(Velocidad (µmol/min))
(1/[S]( µM))
0.33
0.20
0.10
0.03
0.01

sin inhibidor
0.10
0.07
0.04
0.03
0.02

con inhibidor
0.24
0.16
0.09
0.04
0.03

Graficamos 1/Vo contra 1[S] y obtenemos la siguiente gráfica:

Grafico Nº 02. 1/Vo vs 1/[S]
0.12
0.10

1/Vo

0.08
0.06
0.04
0.02
0.00
-0.20

-0.10

0.00

0.10

0.20

0.30

1/[S]

Calculamos Vmax:
1
= 0.021 → ???? = 47.62 µ?/???
????
Calculamos Km:
1
−
= −0.085 → ?? = 11.76 µ?
??

0.40

En presencia del inhibidor.
Graficamos V0 contra [S] y obtenemos la siguiente gráfica:

Grafico Nº 03. Vo VS [S]
40

Vo (µmol/min)

35
30
25
20
15
10
5
0
0

20

40

60

80

100

[S] µM

Transformamos en una función lineal y obtenemos la representación de
Lineweaber - Burk (o de dobles inversos) para calcular con precisión Vmax y Km.

1/(Velocidad (µmol/min))
(1/[S]( µM)) sin inhibidor
0.33
0.10