Deshidrogenacion del acido succinico
Universidad Veracruzana
Facultad de Ciencias Químicas
Laboratorio de Bioquímica Metabólica
Practica # 1
Deshidrogenación del ácido succínico
Objetivo:
Que el alumno aprecie la actividad de la enzima de succinato deshidrogenasa mediante una reacción colorimétrica.
Fundamento:
La enzima succinato deshidrogenasa o deshidrogenasa del ácido succínico es una Oxidorreductasa que cataliza la oxidación del succinato para formar fumarato siendo la coenzima el FAD. Esta enzima se localiza en eucariotes en la membrana mitocondrial interna.
El H2 cedido por el succinato puede ser transferido del FADH2 a un colorante susceptible como el azul de metileno que al cambiar su estado redox pasa de coloreado a incoloro o viceversa. …ver más…
El diferente o tubo “A” a diferencia del tubo “B, C, y D” se tonalidad azul era mayor.
Aproximadamente a los 6 min; la tonalidad del azul de los tubos “B,C y D” disminuyo, mientras que el tubo “A” se mantuvo igual
A los 11 min; esta tomo una tonalidad más clara. el tubo “B”, después el “C”, después el “C” y por último el “D”.
Su coloración de los tubos “B, C y D” ya es totalmente blanca, con una anillo en la parte superior.
A los 30 min; el anillo del tubo “A” con coloración azul, en el aceite de inmersión se formó un anillo rosa
Resultados:
TUBO
CONTENIDO
COLORACION INICIAL
COLORACION FINAL
A
CONTROL
++++
+++
B
ACIDO SUCCINICO
++++
+1/2
C
ACIDO MALONICO
++++
+
D
ACIDO SUCCINICO/MALONICO
++++
++1/2
Imágenes:
Conclusiones:
Se pudo concluir que por medio de las tinciones colorimétricas la enzima deshidrogenasa se cataliza por la oxidación del succinato para formación del fumarato, siendo la coenzima FAD, donde el FADH a un colorante más susceptible como el azul de metileno, que este entro como azul de metileno oxidado y salió reducido, dando el FADH.
Cabe de resalta que los factores de temperatura pueden afectar, asi que esta se mantuvo constante para un buena conclusión.