Biocatalisis Enzimatica
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
Informe de Laboratorio: Cinética Enzimática
Felipe Pequeño Leclerc
Paola Rebolledo Leal
José Serrano Escudero
Profesor de asignatura: Zaida Cabrera
Lunes 6 de Septiembre de 2010
Introducción
Es sabido que las reacciones químicas necesitan de cierta cantidad específica de energía para que ocurran. A la energía necesaria para que los reactivos formen el complejo activado se le llama energía de activación, Ea. Sin embargo, las reacciones pueden llevarse a cabo por medio de compuestos llamados Catalizadores, los cuales tienen como función disminuir la Ea necesaria para llevar a …ver más…
Con este método las proteínas tienen una capacidad de absorción máxima de 465 eso cambia a 595 nm cuando el colorante esta unido a las proteínas. Este es el principio básico del azul de Coomasie para la determinación de proteínas por Bradford (Shapiro. 1967).
La ventaja de este método es su simplicidad (solamente un reactivo) y su rapidez (15 minutos a temperatura ambiente). El método de Bradford es más sensible que el método de Lowry y no es afectado por los reactivos utilizados, siempre y cuando el pH se mantenga dentro de los rangos establecidos. No interfieren las formas catiónicas ni los carbohidratos como la glucosa o la galactosa.
Los detergentes y álcalis son los que interfieren en el ensayo en algunos casos esto puede ser corregido. El color máximo se desarrolla en aproximadamente 15 minutos, pero el puede disminuir de tono en aproximadamente una hora. En cuanto sea mayor la concentración de proteínas, la disminución máxima ocurre a las cuatro horas. Por todo lo anterior, la lectura en el espectrofotómetro debe llevarse a cabo antes de una hora añadido el reactivo y 15 minutos después de adicionarlo.
Acerca de Lactosa:
Es un hidrato de carbono que solo se encuentra en la leche. Es un disacárido luego está compuesto por dos moléculas: galactosa y la glucosa unidas por un enlace beta-glicosídico. Por su estructura se unen en el