Avaliação da Atividade da Maltase
Débora Maria Alves Viegas Gustavo Morandi Rahmé Mayara Franco Rodrigues

Objetivo
• Avaliar a atividade da enzima maltase obtida através do fracionamento celular da levedura Saccharomyces cerevisiae presente no fermento (Fermix). • Realizar diluição do lisado da levedura para em seguida, construir a curva padrão do fenol e determinar a atividade da enzima na melhor diluição escolhida.

Introdução
• As leveduras (pertencentes ao grupo dos fungos) são organismos eucarióticos unicelulares que existem no solo, ar, plantas, frutos e alimentos. • A espécie mais comum é a Saccharomyces cerevisae, conhecida vulgarmente como levedura de padeiro ou da cerveja. • Encontra-se no centro da Biotecnologia …exibir mais conteúdo…

Os tubos de ensaio foram preparados de acordo com a seguinte tabela: Tabela 2. Indicação dos volumes utilizados de Solução de fenol, tampão Na2CO3-NaHCO3 e água para as respectivas medidas de absorbância e construção da curva padrão. Tubos 1 2 3 4 5 6 Solução de Fenol(µL) 0 40 80 120 160 200 H2O (µL) 200 160 120 80 40 0 Tampão(µL) 2500 2500 2500 2500 2500 2500

Resultados e discussões
• A partir da tabela abaixo, fez-se uma curva padrão de fenol (absorbância x quantia de fenol (μmol)):
Tabela 3. Indicação dos volumes utilizados de Solução de fenol, tampão Na2CO3-NaHCO3 e água e as respectivas medidas de absorbância

Tubos 1 2 3 4 5 6

Solução de fenol (μL) 0 40 80 120 160 200

H20 (μL) 200 160 120 80 40 0

Tampão (μL) 2500 2500 2500 2500 2500 2500

Fenol (μmol) 0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10

A420nm 0 0,110 0,214 0,320 0,438 0,543

Gráfico 1. Curva Padrão do fenol, valores de absorbância x quantia de fenol (μ mol).

• Fez-se a regressão linear a qual é observada no gráfico, sendo esta:

y = 5,4429x - 0,0021
• A partir da analise da regressão linear obteve-se o coeficiente angular o qual tem mesmo valor que o coeficiente de absortividade (a):

Coeficiente angular = 5,4429 logo, a = 5,4429 μmol-1 cm-1
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• Determinou-se a melhor diluição do lisado da enzima observando-se o gráfico 1 (Curva