Tinciones Bacterianas:

La tinción o coloración es una técnica que nos ayuda en microbiología para mejorar el contraste de la imagen vista en el microscopio.

* Preparación de la muestra:

Para teñir microorganismos se debe depositar una pequeña cantidad de la muestra a examinar sobre un portaobjeto limpio (1 – 2 gotas de cultivo líquido). Si la muestra proviene de un medio sólido, esta se emulsiona con unas gotas de suero fisiológico estéril. La muestra se extiende con el asa, hasta que quede una fina película sobre el portaobjeto. Esta película se denomina frotis.
Para teñir el frotis, éste debe estar seco. Esto se logra mediante un procedimiento llamado fijación, que puede realizarse usando sustancias químicas o calor. Lo …ver más…

Por el contrario la capa de peptidoglucano de las gramnegativas es más fina, con menos enlaces y con poros de mayor tamaño. Además, es posible que el alcohol extraiga suficientes lípidos de la membrana externa gramnegativa como para aumentar su posterior porosidad. Por este motivo el alcohol elimina más fácilmente el complejo cristal violeta-lugol en las bacterias granmegativas.

Tinción diferencial de Ziehl-Neelsen: los microorganismos pertenecientes al género Mycobacterium se caracterizan por tener una pared celular completamente diferente a las demás bacterias. La pared de microbacterias posee un alto contenido de lípidos que la hace impermeable a los agentes hidrofílicos, por lo tanto estos microorganismos no se tiñen adecuadamente con la coloración de Gram. Para teñir microbacterias se usa el método de Ziehl-Neelsen (o Tinción Acido-Alcohol Resistente), el cual utiliza como solución decolorante una mezcla de etanol y ácido clorhídrico. Estos microorganismos una vez coloreados son resistentes a la decoloración ácido-alcohólica y por eso se denominan Bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR). Técnica:
1. Verter sobre el frotis previamente fijado, de 10 a 15 gotas de carbolfucsina.
2. Calentar hasta emisión de vapores. Repetir 1 a 4 veces el mismo procedimiento.
3. Decolorar con alcohol clorhídrico (HCl-etanol).
4. Lavar con agua.
5. Teñir con azul de metileno, durante un minuto.
6. Lavar con agua y dejar secar.
7.