UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE COAHUILA
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
UNIDAD TORREÓN

BIOQUÍMICA MICROBIANA

PRÁCTICA #12
MÉTODOS DE ANALISIS DE GLUCOSA Y DE FENOL

MAESTRO DE LA MATERIA:
DR. NAGAMANI BALAGURUSAMY

EQUIPO #7

12 DE MAYO DE 2013
TORREÓN, COAH.

Introducción
Se le llama metabolismo al conjunto de reacciones químicas que son catalizadas por medio de enzimas reguladas que tienen lugar en las células. Se divide en catabolismo y anabolismo.
Por otro lado, el cometabolismo es un mecanismo para la degradación de compuestos tóxicos. En este proceso, alguna enzima en una ruta, puede degradar el tóxico sin intención debido a la similitud con la enzima.
Métodos de análisis. …ver más…

Junto con los 0.5 de sobrenadante, agregamos 2.5 ml de reactivo de Bradford para pasar a leer en el espectrofotómetro a 595 nm.
Método de Miller
1) Los 3 tubos de eppendorf con 2 ml de sobrenadante que sobraron de la primera centrifugación se utilizaron para esta prueba.(determinación de azucares)
2) Tomamos 1 ml de cada sobrenadante y lo colocamos en un tubo de ensaye. (Teniendo en total 3 tubos)
3) A cada tubo de ensaye se le agrego 1 ml de reactivo Dinitrosalicilico (DNS)
4) Los tubos se pusieron en un baño maría durante 15 minutos.
5) Pasados los 15 minutos, pasamos el contenido de los tubos a una celdilla de plástico para poder leerlos en el espectrofotómetro.
6) El tubo que contenía el sobrenadante del medio de caldo nutritivo, glucosa y fenol, sobrepaso el límite del espectrofotómetro >3, por lo que hicimos una dilución; tomando 0.1 ml del sobrenadante original y 0.9 ml de agua destilada. Terminada la dilución, pasamos a medir en el espectrofotómetro nuevamente.
Método de Folin-Ciocalteu
1) De los sobrenadantes, que quedaron guardados de los 2 procedimientos anteriores, procedimos a realizar el método de Folin-Ciocalteu. Para nuestra fortuna, en los tres tubos quedaba una cantidad suficiente de sobrenadante para realizar el siguiente procedimiento.
2) De cada tubo de eppendorf que teníamos, tomamos 0.5 ml de sobrenadante como muestra, y los depositamos en un tubo de ensaye. Para el tubo que contenía la muestra del