INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Laboratorio de Sistemas de Control de calidad

PRACTICA NO. 8
EFECTO Y VERIFICACION DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO EN REACTIVOS COMERCIALES

5QM1
México DF 2012

Introducción
Las enzimas son proteínas que actúan como catalizadores biológicos. Un catalizador aumenta la velocidad de una reacción química sin tomar parte de ella, reduce la energía de activación para una reacción y hace que la reacción vaya más rápido en ambas direcciones; la principal característica que diferencia a la enzima de los catalizadores inorgánicos es su alta especificidad, pues actúan en una reacción o en un grupo de reacciones que tienen sustratos semejantes o relacionados …ver más…

Dilución
Conc. Sustrato
⅀Δ Abs
Promedio
Actividad enzimática
1:254
0.0390625
0.002
0.0005
1.38
1:128
0.078125
0.001
0.00025
0.69
1:64
0.15625
0.006
0.0015
4.14
1:32
0.3125
0.003
0.00075
2.07
1:16
0.625
0.017
0.00425
11.73
1:8
1.25
0.016
0.004
11.04
1:4
2.5
0.031
0.00775
21.39
1:2
5
0.028
0.007
19.32 sin diluir
10
0.05
0.01
27.6

Tabla 2. Cálculo de la concentración enzimática por volumen (U/L)

Gráfica 2. Actividad enzimática por cada concentración
Km= 0.4mM

Determinación de Km de la enzima.

y = 0.047x + 0.0174

Donde:

0.038=71.42 x Km

Discusión
La fosfatasa alcalina es una enzima presente en gran parte de las células y tejidos corporales esta enzima tiene como función hidrolizar los enlaces fosfatos, cuando se determina el progreso de la reacción utilizando concentraciones variables de enzima, se puede comprobar cómo ésta es factor limitante de la velocidad, siendo dicha velocidad proporcional a la concentración de enzima siempre que el sustrato se encuentre en condiciones de saturación tal y como ocurre en las condiciones de trabajo utilizadas, los resultados obtenidos en esta prueba no fueron los esperados tal vez debido a que no se realizo un buen trabajo, solo el resultado de sin dilución seria el correcto porque esta la concentración original del sustrato se esperaría que disminuyeran a la mitad de cada valor incluso en el equipo que