LABORATORIO NRO 5
DETERMINACION DE LA CATALASA Y PEROXIDASA

1. OBJETIVO
Determinación de forma cualitativa de la enzima catalasa y la peroxidasa en tejido vegetal.
Determinación de forma cuantitativa la acción de la enzima catalasa.
2. FUNDAMENTO TEORICO
CATALASA
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales.
La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H2O2 (conocida como agua oxigenada).
Esta enzima, descompone el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema.
La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

2 H2O2 …ver más…

La peroxidasa presenta como grupo prostético un grupo Hem, cuyo átomo central de hierro forma complejos con diferentes compuestos, como los cianuros y la hidroxilamina, inhibiéndose su actividad enzimática.
Este efecto del calor sobre la actividad peroxidásica es muy, importante en la industria de alimentos y la regeneración enzimática de la peroxidasa puede causar serios problemas en los caracteres organolépticos.
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1 MATERIALES:
Tubos de ensayo
Cajas petri
Pipetas de 1 ml y 10 ml
Tabla para cortar
Cuchillos
Balanza analítica
Matraz erlenmeyer
Pinzas
Papel filtro
3.2 REACTIVOS:
100 gr de muestra
Tampón fosfato 0.1 M
H2O2 0.01 M Y 0.1 M
KMnO4 0.001 M
Guayacol 0.2%
Etanol
Agua destilada
Experiencia#1:
“DETERMINACION CUALITATIVA DE LA CATALASA”
Tratamiento Térmico

1. Cortar 5 cubos de muestra (papa y nabo) de 1cm3
2. En el B. maría, (a 65ºC) colocar un vaso ppdo con agua destilada.
3. Colocar los cubos preparados cuando alcance esa temperatura el agua del vaso.
4. Retirar un cubo a cada 5 min y colocar en un vaso con agua destilada para enfriar.

Determinación Cualitativa

1. Luego cortar los cubos en tres partes (cortes paralelos)
2. Colocar la parte central en un tubo de ensayo con 5 ml de H2O2 0.1 M.