Universidad Santo Tomás.
Escuela de Agronomía
Microbiología.

LABORATORIO Nº 5

“PRUEBAS BIOQUÍMICAS”

Introducción:

Los propósitos del presente laboratorio son:

• Estudiar la naturaleza y actividades de exoenzimas y endoenzimas. • Realizar procedimientos experimentales que nos permitan diferenciar microorganismos entéricos y de otra naturaleza. • Entender, comprender y aplicar técnicas de procedimientos bioquímicos para la identificación de microorganismos.

Los microorganismos pueden ser separados e identificados de acuerdo a una gran variedad de razones, tales como:

1. Determinación de patógenos responsables de enfermedades infecciosas. 2. Selección y aislamiento de cepas de …ver más…

Las propiedades bioquímicas son las características más puntuales de los microorganismos, ya que evidencian la existencia de enzimas o metabolitos de las vías metabólicas, que a su vez son la expresión de un determinado gen del DNA. Existe un gran número de pruebas bioquímicas que nos permiten determinar la presencia de enzimas (exoenzimas y endoenzimas), o si un microorganismo es capaz o no de utilizar un determinado carbohidratos y si lo utiliza por qué vía lo hace (fermentativa u oxidativa), etc.

A continuación se han seleccionado algunas de las pruebas bioquímicas más utilizadas para la identificación de bacterias, principalmente de importancia clínica.

A.- Enzimas asociadas a la respiración: Oxidasa y Catalasa

Todas las bacterias aeróbicas obtienen su energía por la respiración, en donde el oxígeno molecular actúa como último aceptor de electrones, produciendo agua o peróxido de hidrógeno, según la especie bacteriana y su sistema enzimático.

1. Prueba de la Oxidasa:

La prueba de la oxidasa está basada en la producción bacteriana de una enzima oxidasa (citocromo-oxidasa), la cual media el traspaso del electrón al oxígeno formando agua. Todos los organismos que poseen la enzima oxidasa son aerobios o anaerobios facultativos, ya que esta respuesta positiva está limitada a aquellos organismos capaces de desarrollarse en presencia de oxígeno.

Citocromo reducido Citocromo oxidado