Universidad Tecnológica Metropolitana
Facultad de Ciencias Naturales, Matemáticas y de Medio Ambiente
Departamento de Biotecnología- Escuela de Industria Alimentaria

Laboratorio Nº 2

“Determinación espectrofotométrica de Fe en un cereal”

Profesora: Verónica Acuña Sección de laboratorio: 01 Integrantes: Angélica Campos. María José Espinoza. Claudia Matamala. Francisca Rodríguez. …ver más…

Espectrofotometría de UV- Visible: Es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración, a través de la ecuación de Lambert-Beer. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda donde la muestra presenta la máxima absorción, y tras realizar las correspondientes rectas de calibrado se cuantifican las concentraciones de distintas biomoléculas.

La absorbancia de define como; Donde

En esta expresión a, corresponde a la absortividad, b (o l) corresponde a la distancia recorrida por el haz de luz (paso óptico) y c es la concentración. Si la concentración es expresada en molL-1, la ley de Lambert-Beer queda expresada entonces como:

Siendo , la absortividad molar expresada como Lmol-1cm-1

Método de Patrón Externo: Consiste en medir la señal instrumental de una serie de disoluciones patrón, preparados con concentraciones variables y exactamente conocidas de analito en estudio. Estas soluciones se preparan de tal forma que abarquen el rango deseado de concentraciones de analito, utilizándose un mínimo de tres patrones. Este método permite analizar un conjunto de muestras utilizando una sola curva de calibración. Una de las