Prueba de Ames
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1.- Explica cuales son las características de la cepa Salmonella typhimurium LT-2 utilizada en la prueba de Ames.Salmonella es una bacteria gram negativa, más específicamente es un bacilo gram negativo de aproximadamente 2 x 0.5 micrómetros. Salmonella Typhimurium se multiplica en el tracto gastrointestinal de muchas especies animales donde usualmente no causa enfermedad. En los seres humanos su crecimiento causa gastroenteritis. De 6 a 48 horas después de la ingestión de agua o alimentos (por lo general, aves de corral o carne) contaminados, la enfermedad se puede desarrollar con un cuadro de náusea y vómito, a menudo seguido de diarrea.
S. typhimurium causa una enfermedad sistémica en ratones que es similar a la fiebre …ver más…
La cepa TA1538 es un mutante his D3052, resultado de la delección de un par de bases en el operón de la histidina (mutación frameshift),presentando también las mutaciones uvrB y t-fa, antes descritas.
Por su parte, la cepa TA98 tiene las mismas características genéticas que la TA1538 de la que deriva, con excepción de la presencia del plásmido pKM 101, que le confiere una mayor susceptibilidad para la reparación con tendencia a error del ADN.
3.- Realiza un cuadro explicando los diferentes tipos de mutaciones génicas que existen.
4.- Cuales son los criterios en esta prueba para determinar si un agente es mutagénico o no.
Diferentes cepas de S. typhimurium auxotróficas a histidina son expuestas a una muestra con y sin activación metabólica y plaqueadas en agar medio mínimo con histidina/biotina. Dada la composición del medio de cultivo, se forman colonias con las células prototróficas a histidina (his-), procedentes de mutaciones espontáneas u originadas de mutaciones provocadas por la muestra problema. Después de 66 horas de incubación a 37°C, las colonias revertantes son contadas. El valor igual o mayor a dos, de la expresión obtenida de dividir el número de revertantes en las placas de prueba entre el número de revertantes de las placas control, indica la presencia de actividad mutagénica en la