CURSO: Biología Celular Y Molecular
TEMA: “Organización Celular: Células Procariotas y Eucariotas”

Procedimiento:

1.-Observación de células procarióticas (bacterias): Coloración Gram.
Con un hisopo se extrajo una muestra de sarro dentario y se procedió a hacer un frotis en la parte central del portaobjetos.

Luego llevamos esa muestra al mechero para secarla.

Después de sacarla del mechero, echamos el colorante cristal violeta por 1 minuto y luego lo lavamos con agua de caño

A continuación agregamos lugol por 1 minuto y volvimos a lavar con agua corriente

Seguidamente lavamos la muestra con alcohol – acetona hasta que dejara de arrastrar colorante y después la lavamos con agua corriente

Agregamos colorante safranina …ver más…

| * Clostridium | * Rickettsia | * Mycobacterium | * Espiroqueta | * Diphtheriae | * Spirillum minor | * Clostridium perfringens | * Klebsiella pneumoniae |
La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino que este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea. 2. Haga un relación de bacterias patógenas y si son gram positivas o negativas 3. ¿Por qué no se puede observar la estructura y medir el espesor de la membrana plasmática en el microscopio compuesto de campo claro?
Esto se debe que el poder de resolución y de aumento del microscopio compuesto de campo claro no alcanza a