PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DE VALPARAISO
FACULTAD DE AGRONOMÍA

QUI-343
BIOQUÍMICA
INFORME Nº 1: ESPECTROFOTOMETRÍA: CUANTIFICACIÓN

2do. Semestre 2010
Introducción

La absorción de luz por parte de una sustancia es una propiedad característica de ella, que puede ser utilizada para su identificación y cuantificación. Todas las sustancias absorben luz en alguna región del espectro electromagnético (VIS, UV, IR, etc.). La absorción de luz depende de la estructura química del compuesto absorbente, y en especial de ciertos grupos funcionales, de modo que es posible identificar un compuesto por medio de las características de su espectro de absorción.

Para medir este valor de …ver más…

Objetivos

a) Generales:

- Comprender los fundamentos teóricos de la espectrofotometría y su aplicación en la cuantificación de proteínas.

- Comprender los fundamentos teóricos de los métodos de Biuret y Lowry, para luego cuantificar proteínas ocupando ambas técnicas espectroscópicas.

b) Específicos:

- Realizar algunos problemas relacionados con cuantificación de proteínas mediante análisis espectrofotométrico

- Determinar la concentración de proteínas en una muestra problema de caseína y leche, mediante el método de Biuret.

- Determinar la concentración de proteína en la muestra problema, mediante el método de Lowry.

- Responder algunas preguntas relacionadas con la espectrofotometría y la cuantificación de proteínas.

Desarrollo Ejercicios

- Problema 1:

a) Una disolución de cobalto de 5x10-3 M se coloca en una cubeta con una longitud de paso de 1cm. La absorbancia a 580 nm es 0,416. ¿Cuál es el valor de a 580 nm?

R: Utilizando la fórmula: A = ε l C, reemplazamos