INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

BIOQUÍMICA MICROBIANA
LABORATORIO
PRÁCTICA No.4
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA FORMIATO DESHIDROGENASA Y NITRATO REDUCTASA EN Escherichia coli
SECCIÓN 1 EQUIPO 3 * CARREON DIAZ RUBEN RODRIGO * CAMACHO GARCIA JÓSE FRANCISCO * ACOSTA AGILAR ISIS LIZETH * IBARRA RODRÍGUEZ JAIME IVAN 6QM1

OBJETIVOS:
Analizar la actividad de la formiato deshidrogenasa, nitrato reductasa y del complejo formiato deshidrogenasa-nitrato reductasa en Escherichia coli, a partir de cultivos diferentes con condiciones distintas .De los datos que se obtengan analizar y discutir cómo es que se comporta Escherichia coli en cada uno de los cultivos empleados.
Evaluar la respiración aerobia y la …ver más…

La determinación de proteínas en los 4 extractos se hace por el método Lowry este utiliza una solución, scn 1, que contiene cobre (aumenta la sensibilidad en la determinación de proteínas) y un reactivo, llamado Reactivo de Folin, que se reduce en presencia de proteínas. Este reactivo es una disolución de tungstato sódico y molibdato sódico en ácido fosfórico y ácido clorhídrico. Donde el Cu2+, en medio alcalino, forma un complejo con los enlaces peptídicos de las proteínas reduciéndose a Cu+. Este ion, así como los grupos R de los residuos de tirosina y triptófano de las proteínas, reaccionan con el reactivo de Folin, produciendo inicialmente un producto inestable, que se reduce para formar un compuesto coloreado. Donde la intensidad de color producido es proporcional a la cantidad de proteína que se encuentre presente. Y por un método espectrofotométrico se determina la cantidad de proteína que está presente.

RESULTADOS:
Tabla 1.- Curva tipo de proteínas μg de proteína | A600 | 0 | 0 | 100 | 0.214 | 200 | 0.387 | 300 | 0.481 | 400 | 0.671 | 500 | 0.701 |
Tabla 1.1.- Valores de la ecuación de la recta derivados de la curva tipo de proteínas. M | 0.0014 | B | 0.054 | R | 0.9834 | R2 | 0.9671 |

Grafico 1.- Curva tipo de proteínas. Se muestra en el grafico la ecuación de la recta obtenida de la tendencia lineal que presenta la curva.

Tabla 2.- Curva tipo de nitritos Nanomoles de nitrito | A520 | 0 | 0 | 5 | 0.102 | 10 | 0.141