PROPUESTA TRABAJO EXPERIMENTAL LABORATORIO BIOQUÍMICA QIM-117
PROTEÍNAS, α-LACTOALBÚMINA
Integrantes del grupo:
Integrante 1:
Integrante 2:

OBJETIVO GENERAL: Aislar y purificar una proteína de la leche
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Aislar y purificar la proteína α-lactoalbúmina de la leche
2. Cuantificar la proteína α-lactoalbúmina de la leche
FUNDAMENTOS:
Para realizar el estudio de la composición y estructura de las proteínas, estas se deben aislar y purificar. Cada proteína tiene una secuencia diferente de aminoácidos lo cual las hace distintas unas de otras. Es por ello que los Métodos de separación se encuentran basados en las propiedades que presentan proteínas frente a, diferentes solventes, cambios de PH, …ver más…

Este método depende, pues de la interacción relativamente inespecífica entre un colorante hidrofóbico y las proteínas, por lo que es relativamente sensible a la presencia de contaminantes tales como restos de detergente y líquidos orgánicos como el metanol.

En esta práctica nos ocuparemos únicamente del método de Lowry para la cuantificaciíon. Tiene la ventaja de ser extremadamente sensible, capaz de detectar cantidades del orden de 10 microgramos de proteína; su inconveniente principal es que al evaluar, los fenoles presentes en la proteína (esencialmente residuos de tirosina), la intensidad del color resultante varía entre las distintas proteínas. Pero cuando tratamos con mezclas biológicas complejas, podemos perfectamente calibrar el método con alguna proteína comercial, como es la seroalbúmina bovina.
PROCEDIMIENTO:

Aislamiento y purificación de la proteína α-Lactoalbumina de la leche (5)

Reactivos y materiales:
• 1 Vaso precipitados de 100 ml
• Mechero
• Trípode
• rejilla
• Embudo Buchner,
• papel filtro
• Pipeta graduada
• Papel PH
• Bagueta
• 4 Vasos de precipitado de 50 ml
• Centrifuga
• Termómetro, gotario
• Soporte universal
• 60 ml de leche descremada
• HCl concentrado
• HCl 1 M
• H₂O destilada
• NaOH 1 M
• NaSO₄ 20%

Procedimiento experimental:

-Para lograr aislar alfa-lactoalbúmina debemos realizar en primera instancia el aislamiento de la caseína.

1. Colocar 100 ml de leche en una