REAÇÕES QUALITATIVAS PARA AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS

1 – REAÇÃO COM BIURETO
Fundamento teórico: O Biureto é um reagente analítico, composto de Hidróxido de Sódio (NaOH 2,5N) e sulfato de cobre 1% (CuSO4).

A reação do Biureto é detectar a presença de ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para substâncias que contêm 2 carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio.
Os compostos com duas ou mais ligações peptídicas atingem uma coloração violeta quando submetidos a uma solução diluída de sulfato de cobre em meio alcalino. A intensidade da cor varia com a concentração de proteínas. Nesse …exibir mais conteúdo…

Técnica : (6 tubos) Em cada tubo de ensaio foi pipetado 1mL da solução de ninhidrina e adicionado 1mL de cada um dos reagentes descritos abaixo:

Tubo 1: 1mL de água destilada;
Tubo 2: 1mL de leite;
Tubo 3: 1mL de clara de ovo diluída;
Tubo 4: 1mL de prolina 1%;
Tubo 5: 1mL de glicina 1%;
Tubo 6: 1mL de albumina 1%.
Foi adicionado em cada tubo, aproximadamente 1mL do reagente de nihidrina, agitando-se continuamente e fervendo em seguida por alguns minutos em banho-maria, até o aparecimento da cor.

Resultados: Tubo 1: Resultado NEGATIVO  A água não apresenta aminoácidos em sua composição.

Tubo 2: Resultado POSITIVO  Coloração roxo  Aquecendo-se uma proteína e depois adicionando-se a nihidrina forma-se uma coloração azul por causa da reação desse reagente com os aminoácidos presentes na proteína do leite. As proteínas podem desdobrar-se por hidrólise em aproximadamente 20 aminoácidos

Tubo 3: Resultado POSITIVO  Coloração liláz.  Como o leite, a clara de ovo apresenta várias proteínas em sua composição, inclusive albumina.

Tubo 4: Resultado POSITIVO  Coloração amarela  A prolina é um dos aminoácidos codificados pelo código genético, sendo portanto um dos componentes das proteínas dos seres vivos. Diferencia-se dos demais aminoácidos devido ao fato de possuir uma estrutura quimicamente coesa e rígida, sendo mesmo o aminoácido mais rígido dos vinte que são