Determinación de la Concentración de Hemoglobina
FUNDAMENTO

Es una proteína conjugada de color rojo, existen varios métodos para determinación como hematía ácida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; este último es el de elección por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estándares de cianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotómetro de uso común y corriente.

La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactuvo, con el ferrocianuro de potasio se oxida el átomo de fierro de ferroso a ferrico para producir metahemoglobina. El cianuro de cianometahemoglobina.
La coloración produce una concentración de hemoglobina.

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Cada subunidadcontiene un grupo hemo (región ligante de oxigeno, que contiene un átomo dehierro ferroso), por lo cual una molécula de hemoglobina puede unir 4moléculas de oxigeno.La hemoglobina reducida es hemoglobina con hierro no asociado al oxigeno.Cuando cada grupo hem se asocia con una molécula de oxigeno, lahemoglobina toma la forma de oxihemoglobina.Tanto en la hemoglobina reducida como en la oxihemoglobina, el hierro permanece en estado ferroso (Fe ++. Con el hierro oxidado al estado ferrico seforma Meta hemoglobina y la molécula pierde su capacidad para transportar oxigeno y dióxido de carbono.El método que se utilizara para realizar esta determinación se denominaMétodo de la Cianometahemoglobina y se fundamenta en que al combinar unvolumen determinado de sangre con una solución que contiene k3fe (CN)6 yKCN (solución de Drabkin), el ferrocianuro convierte el hierro ferroso de lashemoglobinas en ferrico, para formar metahemoglobina y la molécula pierdesu capacidad para transportar O2. Luego la meta hemoglobina se combina conel cianuro de potasio para formar cianometahemoglobina de color rojoanaranjado brillante, apto para la determinación calorimétrica.
MATERIALES
-10 tubos de ensayo-1 gradilla-alcohol rectificado-algodón-jeringas desechables-torniquete-pipeta automática (20 ul)-pipetas graduadas de 5 a 10 ml-puntas amarillas adaptables para pipeta automática-guantes-tubos de