LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

FOTOMETRÍA

JUAN DANIEL DANGOND
ANGELICA MARIN
ZARIANA REYES
DANIS RUMBO
HIDELIS SIERRA

DOCENTE:

MARTÍN NÚÑEZ CANTILLO

U N I V E R S I D A D P O P U L A R D EL C E S A R
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
SEMESTRE III
VALLEDUPAR-CESAR

ÍNDICE DE EXPERIMENTOS:

1. Determinación del Espectro de Absorción De Azul De Evans.
2. Demostración de la Ley de Beer.
3. Determinación fotométrica de la hemoglobina.

Objetivo:

Demostrar las leyes que fundamentan los análisis fotométricos y su aplicación a la Bioquímica Clínica.

Experimentos:

Experimento 1: Determinación del Espectro de Absorción De Azul De Evans.

Objetivos: …ver más…

Anotar la longitud de onda de absorción máxima (transmitancia mínima) encontrada.

Expresión de resultados: elaborar un gráfico de la absorbancia en función de la concentración del colorante en cada disolución. Observar si se cumple la Ley de beer.

Experimento 3: Determinación fotométrica de la hemoglobina.

Objetivos:

Aplicar las Leyes de Beer a la determinación fotométrica de la hemoglobina.

Cuantificar la hemoglobina en sangre humana por el método de cianometahemoglobina.

Fundamento: El método en que la hemoglobina, al diluir la sangre en una solución de cianuro y ferrocianuro potásico, se oxida a metahemoglobina la cual se transforma a su vez en cianometahemoglobina a color anaranjado brillante apto para la determinación fotocolorimétrica.

Esta experiencia nos puede ilustrar el aspecto que, a diferencia de los colorantes y aún de la misma hemoglobina, la mayoría de los compuestos colorimétricamente pero solo después de someterlo a la acción de un reactivo químico especifico que origine un producto coloreado.

Método: Cianometahemoglobina.

Materiales:

1. Solución de Drabkin: Bicarbonato de sodio 1g/1 cianuro de potasio 0,05g/l; ferrocianuro de potasio 0,2g/l.
2. Solución de EDTA al 10%.
3. fotocolorímetro.

Procedimiento: En u tubo de ensayo se colocan 5ml de reactivo de Drabkin y se agrega, con una pipeta de Salí, 0,2ml de sangre. La pipeta se enjuaga varias veces con el diluyente. Mezclar bien, dejar en