extracción de adn
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Escuela de Química.
Laboratorio 6 de bioquímica
Aislamiento del ADN a partir del Bazo de Cerdo
Extracción de ADN de Tejido Vegetal
Profesora: Albertina Montenegro
Integrantes: Roger Chávez; Fany Solís
8 de octubre de 2012
Objetivos:
• Extraer ADN del Bazo de cerdo.
• Preparar un amortiguador salino.
• Extraer ADN de una banana.
• Diferenciar entre la extracción de ADN de tejido animal y de tejido vegetal.
• Poner en práctica otro procedimiento para la extracción de ADN.
Marco teórico:
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas: En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder …ver más…
Bazo de Cerdo
Banana
Procedimiento:
Aislamiento del ADN a Partir del Bazo de Cerdo
Amortiguador salino: NaCl 0,15M, amortiguado con citrato de sodio 0,015M a pH7.
-Picamos con la ayuda de un cuchillo los 50g de bazo de cerdo y luego lo mezclamos con 100 mL de amortiguador. Se licuó por un minuto.
-Centrifugamos a una velocidad de 5000 rpm por 15 minutos, luego se decantó.
-Homogenizamos y añadimos 100 mL de amortiguador.
-Se centrifugó por 5 minutos más. Se decantó.
-Añadimos 100 mL de NaCl al 2M y se volvió a centrifugar por 15 minutos.
- El Sobrenadante le agregamos una doble cantidad de alcohol al 95%.
- Se extrajo el ADN y lavamos lo obtenido con etanol al 80 % y lo guardamos en una mezcla de amortiguador/agua 1:10.
Extracción de ADN de tejido vegetal
A. Mezclamos una banana con 200 mL de agua en frio. Se licuó por un minuto.
B. Se agregó una cucharada de shampoo con sal y 20 mL de agua.
-Se mezcló 50 mL de A + B por 5 minutos.
-Se filtró y se añadió alcohol.
-Se dejó reposar por 3 minutos.
-Se separó el ADN con un gotero y se guardó. Resultados:
Extracción de ADN de tejido animal
Muestra Observación Aquí se observa los filamentos formándose al agregar el alcohol a la solución de bazo que preparamos. El ADN tiene apariencia de una sustancia mucosa blanca y filamentosa. El ADN precipito por el alcohol y también separa el ADN de otros componentes celular, los cuales son dejados en la