Practica De Metodo De Kunitz
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticasLas enzimas proteoliticas o proteasas son un …ver más…
DISCUSIONES
En esta práctica se trabajó con 3 enzimas diferentes, la tripsina (como enzima estándar) y la papaína y bromelína como enzimas para determinar su actividad enzimática. Como sustrato se uso la caseína debido a que es una proteína rica en aminoácidos aromáticos y rica en serina y el reactivo utilizado para detener la reacción fue el TCA (ácido tricloroacético) al 10 %, ya que es una sustancia acida, lo cual disminuye el p H de la solución inactivando a la enzima.
Los tubos problema y testigo llevaron los mismos reactivos y mismos volúmenes con el mismo tratamiento de incubación por 20 minutos, con la diferencia que en los tubos problema se adicionó la caseína antes de adicionar el TCA después de los 20 minutos para que esta proteína fuera hidrolizada, y los tubos testigo también fueron incubados con la caseína por 20 min, pero después de este tratamiento se adiciónó el TCA y después la enzima para que se evitara la hidrólisis de la caseína y al momento de obtener su absorbancia, esta restárcela a las obtenidas de los problemas y obtener las absorbancias corregidas, esto se realizó con la razón de que el tubo problema, después de llevar a cabo la hidrólisis, los productos de reacción no solo serian los aminoácidos solubles y péptidos, sino que también la enzima y proteína no hidrolizada y en las lecturas de absorbancias se