Estudio la estabilidad del glóbulo rojo frente a soluciones con distinta tonicidad (transporte de agua y fragilidad de la membrana)

Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias, Instituto de Bioquímica.

Esteban Corales
Néstor Corro
Carolina Ehrenfeld
Introducción
Para poder estudiar como distintas soluciones afectan la integridad de la membrana, es necesario tener ciertas variables controladas. Además de la temperatura, un factor importante es la concentración de solutos tanto dentro como fuera de una célula, conocido como equilibrio osmótico. El presente protocolo tiene por finalidad demostrar el efecto de dos soluciones, una hipotónica y otra hipertónica, a base de concentraciones de NaCl, en la integridad de la membrana …ver más…

Para eso agregamos en un tubo de ensayo, 2,5ml de NaCl 1M (NaCl 2 osmoles por litro) y rellenamos con agua destilada hasta el volumen de 5ml. -Solución Hipotonica: Glóbulos rojos serán sometidos a una solución 50mOsm de NaCl. Para esto agregamos a un tubo de ensayo, 125μl de NaCl 1M y rellenamos con agua destilada hasta el volumen de 5ml. 3. Efecto de la Sacarosa en medio Isoosmótico.
Se usara una solución Isoosmótica de Sacarosa, para estudiar la permeabilidad de la membrana a compuestos no polares pequeños.
-Solución Isoosmotica de Sacarosa: Los glóbulos rojos serán sometidos a una solución Isotónica de Sacarosa en agua. Para esto, agregamos a un tubo de ensayo, 1,28ml de Solución de Sacarosa 40%p/v y rellenamos hasta el volumen de 5ml con agua destilada. De esta manera tendremos 308mOsm de sacarosa en el medio.
A estas tres soluciones, se le agregaran entre 2 a 3 gotas de la re suspensión de glóbulos rojos obtenidos previamente. Se debe anotar la apariencia de cada tubo en estado inicial, y luego mantener los tubos por 30 minutos, pero agitando vigorosamente cada 5 minutos. Luego de 30 minutos, mezclar bien cada tubo. Se comparar la apariencia de cada uno de ellos contra un fondo blanco. Una solución transparente indica que la hemólisis ah ocurrido, mientras que si aun esta turbia quiere decir que la hemolisis no ocurrió. 4. Visualización
Para visualizar los efectos