PRÁCTICA 3 – EXTRACCIÓN DE DNA DE KIWI

Resumen:

A partir de una mezcla de kiwi triturado y solución de extracción que se ha calentado, se ha filtrado la mezcla, y a partir del extracto filtrado, se le ha añadido etanol frió haciendo que el DNA de kiwi que había en la disolución precipite y se haga visible.

Objetivos:

Extraer DNA de kiwi mediante procedimientos bioquímicos. Identificar los pasos importantes de protocolo y su funcionamiento. Iniciarse en procedimientos de aislamiento de biomoleculas.

Introducción:

Todas las células contienen DNA. Uno de los avances que permitieron la revolución de la biología molecular, fue el desarrollo de las técnicas de química analítica a finales del siglo XIX y primera mitad …ver más…

En un tubo de ensayo limpio se filtran aproximadamente unos 3 cm de extracto. Con cuidado se le añaden 10mL de etanol frió al extracto obtenido. Se tapa el tubo de ensayo con Parafil, y si invierte suavemente el tubo varias veces observando si se forma algún precipitado en el extracto. Por ultimo, se intenta pescar el precipitado con una varita de vidrio o un clip con tal de observarlo con mayor detalle.

Resultados:

Cambios observados a lo largo del experimento y su explicación bioquímica:

Para lograr extraer el DNA de las células de kiwi se han utilizado métodos de destrucción mecánica y química. En primer lugar se ha aplastado el kiwi con tal de romper mecánicamente las membranas celulares. A continuación se le ha añadido solución de extracto, que al estar compuesta por sal y jabón, con la sal ha hecho que la presión osmótica en el interior de las células y de las membranas nucleares aumente haciendo que estas revienten, y ha separado los restos de las membranas rotas del resto del extracto con el jabón. Seguidamente se ha calentado la mezcla durante 15 minutos a 60ºC, de modo que las proteínas se han desnaturalizado y han precipitado haciendo que la mezcla se enturbia. Tras retirar la mezcla del calefactor se ha filtrado y se ha obtenido un extracto mucho más claro, por lo que significa que gran parte de las proteínas que habían precipitado se han quedado en el filtro al igual que los restos de las membranas celulares y nucleares.