PRACTICA 3: Determinación de Transaminasa Glutámica Oxalacética (TGO)

OBJETIVO: Determinar la actividad de la enzima TGO en el suero de un paciente, como un medio en el diagnóstico de enfermedades del hígado y de infarto al miocardio principalmente.
INTRODUCCION:
La aspartato-aminotransferasa (AST), antiguamente conocida como glutamato-oxalocetato-Transaminasa (TGO) pertenece al grupo de las transaminasas que, por transferencias de grupos aminos, cataliza la transferencia de un grupo amino de aminoácidos específicos (L-glutámico o L-aspártico) a cetoácidos específicos (alfa-cetoglutárico u oxalacético) y viceversa. La aspartato aminotransferasa es muy frecuente en los tejidos del organismo. Aunque se encuentran altas …ver más…

MATERIAL:
Espectrofotómetro con rango de UV
Cubetas o celdillas para el espectrofotómetro
Agua destilada, Gradilla, tubos de 13X100
Centrifuga, reloj de intervalos, Cronómetro
Pipetas pistón de 50, 100, 500 y 1000 microlitros y puntillas
Pipetas graduadas de 5 y 10 ml.
Agua destilada, Torundas con alcohol
Torniquete, gasas, Baño maría a 37ºC
Tubos Vacutainer con gel o secos
Equipo para la determinación de TGO en sangre

NOTAS:
1. Se puede utilizar suero o plasma; se ha comprobado que la heparina, el oxalato, EDTA y citrato no causan inhibición de la enzima. La orina tiene poca o ninguna actividad y no se recomienda para análisis.
2. En los recién nacidos y lactantes se observan niveles aproximadamente dobles que en adultos; estos declinan hasta alcanzar los niveles adultos alrededor de los 6 meses de vida.
3. Debido a la elevada actividad de AST dentro de los eritrocitos, las muestras bemolizadas son inaceptables.
4. La lipemia y el exceso de bilirrubinas pueden interferir en ciertos análisis, principalmente colorimétricos.
5. cuando se congela la muestra, aparentemente no se prolonga la actividad más allá de tres días.

PROCEDIMIENTO:

1.- Se realiza la toma de muestra
2.- Se centrifuga la muestra y se obtiene suero.
3.- Se rotula un tubo de ensayo con la letra M (muestra).
4.- Al tubo M se le coloca 1.0 ml de reactivo de trabajo para