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Tabela 2
Porcentagens de mortalidades corrigida (acumulada) e confirmada de Tetranychus urticae e porcentagem de ácaros mortos contendo cristais, pela inoculação com 45 isolados dos fungos entomopatogênicos.
Dias após a Inoculação |
||||||||||
Espécies* |
Isolados |
3 D.A.I. |
4 D.A.I. |
5 D.A.I. |
||||||
Corrig. |
Conf. |
Cristais |
Corrig. |
Conf. |
Cristais |
Corrig. |
Conf. |
Cristais |
||
M.a. |
E6 |
25,3 |
72,4 |
100,0 |
56,5 |
80,6 |
100,0 |
62,1 |
42,8 |
100,0 |
M.a. |
E9 |
31,5 |
75,7 |
100,0 |
57,3 |
84,0 |
100,0 |
81,9 |
86,9 |
100,0 |
B.b. |
CB 02 |
20,0 |
87,5 |
100,0 |
76,1 |
94,4 |
100,0 |
87,4 |
72,7 |
100,0 |
B.b. |
CB 04 |
0,0 |
100,0 |
100,0 |
21,6 |
76,7 |
80,0 |
38,1 |
64,7 |
90,0 |
B.b. |
CB 06 |
23,2 |
83,3 |
100,0 |
60,2 |
78,0 |
60,0 |
76,2 |
40,0 |
83,3 |
B.b. |
CB 07 |
4,3 |
33,3 |
100,0 |
47,2 |
85,4 |
100,0 |
74,7 |
80,8 |
100,0 |
B.b. |
CB 13 |
16,3 |
39,1 |
88,9 |
56,2 |
76,3 |
100,0 |
80,7 |
95,6 |
100,0 |
B.b. |
CB 14 |
9,1 |
90,0 |
100,0 |
34,1 |
93,7 |
80,0 |
52,4 |
72,2 |
80,0 |
B.b. |
CB 15 |
11,1 |
83,3 |
80,0 |
55,7 |
57,1 |
80,0 |
79,8 |
68,2 |
100,0 |
B.b. |
CB 16 |
6,5 |
100,0 |
100,0 |
56,3 |
92,0 |
100,0 |
79,2 |
95,6 |
100,0 |
B.b. |
CB 21 |
6,5 |
100,0 |
100,0 |
51,3 |
97,8 |
100,0 |
75,0 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
CB 23 |
18,5 |
52,0 |
80,0 |
49,4 |
76,7 |
100,0 |
79,5 |
82,1 |
100,0 |
B.b. |
CB 24 |
4,5 |
100,0 |
100,0 |
54,3 |
96,0 |
100,0 |
77,1 |
95,6 |
100,0 |
B.b. |
CB 44 |
5,4 |
76,9 |
100,0 |
40,4 |
76,5 |
100,0 |
68,7 |
81,5 |
100,0 |
B.b. |
CB 47 |
4,5 |
75,0 |
100,0 |
53,3 |
97,9 |
100,0 |
78,1 |
100,0 |
100,0 |
M.a. |
PL 47 |
17,0 |
100,0 |
100,0 |
67,3 |
100,0 |
100,0 |
94,8 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
PL 63 |
14,2 |
81,2 |
70,0 |
49,3 |
89,2 |
90,0 |
73,6 |
91,7 |
90,0 |
B.b. |
CB 66 |
0,0 |
0,0 |
0,0 |
19,0 |
88,9 |
100,0 |
26,5 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
CB 74 |
17,4 |
62,5 |
100,0 |
50,6 |
75,0 |
100,0 |
72,3 |
85,7 |
100,0 |
B.b. |
CB 75 |
6,5 |
100,0 |
100,0 |
58,4 |
79,2 |
100,0 |
81,3 |
88,5 |
100,0 |
B.b. |
CB 87 |
1,0 |
100,0 |
100,0 |
1,1 |
27,3 |
33,3 |
10,7 |
25,0 |
66,7 |
B.b. |
CB 141 |
36,0 |
86,1 |
100,0 |
56,8 |
95,6 |
90,0 |
69,6 |
92,3 |
80,0 |
B.b. |
CB 145 |
1,0 |
100,0 |
100,0 |
55,0 |
87,0 |
100,0 |
78,0 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
CB 146 |
2,0 |
100,0 |
100,0 |
60,0 |
91,4 |
90,0 |
87,0 |
92,6 |
100,0 |
B.b. |
CB 147 |
29,0 |
82,7 |
80,0 |
48,4 |
86,4 |
100,0 |
57,6 |
90,0 |
88,9 |
B.b. |
CB 149 |
36,0 |
75,0 |
100,0 |
55,8 |
86,4 |
100,0 |
78,3 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
CB 150 |
1,0 |
100,0 |
100,0 |
19,2 |
100,0 |
100,0 |
60,4 |
91,4 |
90,0 |
B.b. |
CB 154 |
3,0 |
100,0 |
100,0 |
57,0 |
81,5 |
100,0 |
82,0 |
92,0 |
100,0 |
B.b. |
CB 157 |
8,0 |
100,0 |
100,0 |
76,0 |
80,9 |
100,0 |
93,0 |
94,1 |
90,0 |
B.b. |
CB 161 |
6,0 |
100,0 |
100,0 |
64,0 |
100,0 |
100,0 |
88,0 |
95,8 |
90,0 |
B.b. |
CB 164 |
7,1 |
75,0 |
83,3 |
43,2 |
71,4 |
100,0 |
65,5 |
66,7 |
90,0 |
B.b. |
CB 165 |
6,0 |
100,0 |
100,0 |
38,4 |
97,3 |
100,0 |
66,7 |
89,3 |
100,0 |
B.b. |
CB 166 |
11,0 |
90,9 |
100,0 |
73,0 |
91,9 |
100,0 |
89,0 |
93,7 |
100,0 |
M.a. |
CB 345 |
36,4 |
94,7 |
100,0 |
64,5 |
100,0 |
100,0 |
88,6 |
100,0 |
100,0 |
M.a. |
CB 347 |
30,3 |
100,0 |
100,0 |
62,4 |
100,0 |
100,0 |
82,9 |
100,0 |
100,0 |
M.a. |
CB 348 |
24,1 |
96,1 |
100,0 |
60,2 |
100,0 |
100,0 |
90,9 |
100,0 |
100,0 |
B.b. |
353 |
14,9 |
100,0 |
100,0 |
41,9 |
96,5 |
100,0 |
72,6 |
96,6 |
100,0 |
M.a. |
1037 |
14,7 |
100,0 |
100,0 |
55,4 |
97,5 |
100,0 |
85,1 |
100,0 |
100,0 |
P.f. |
1205 |
1,5 |
0,0 |
0,0 |
0,0 |
0,0 |
0,0 |
2,9 |
22,2 |
0,0 |
A.a. |
1216 |
1,0 |
0,0 |
0,0 |
1,0 |
25,0 |
0,0 |
1,0 |
0,0 |
0,0 |
M.a. |
1247 |
11,0 |
100,0 |
100,0 |
61,2 |
100,0 |
100,0 |
94,8 |
97,0 |
100,0 |
B.b. |
1260 |
13,0 |
100,0 |
100,0 |
53,1 |
97,6 |
100,0 |
78,4 |
96,0 |
100,0 |
Ht. |
1282 |
24,0 |
95,8 |
0,0 |
55,1 |
100,0 |
0,0 |
73,2 |
88,9 |
0,0 |
M.a. |
1286 |
16,8 |
100,0 |
90,0 |
77,2 |
98,3 |
100,0 |
93,1 |
100,0 |
100,0 |
M.a. |
1294 |
1,1 |
83,3 |
100,0 |
17,4 |
94,4 |
* Espécies de fungos entomopatogênicos: B.b. (Beauveria bassiana); M.a. (Metarhizium anisopliae); Ht. (Hirsutella sp.); P.f.(Paecilomyces farinosus); A.a. (Aschersonia aleyrodis)
Estes cristais são de tamanho e forma variadas, alguns alongados e outros apresentando geometria bipiramidal. Sua constatação nos ácaros foi feita a partir do terceiro dia após a inoculação, correspondendo ao início do período de colonização do hospedeiro pelo patógeno. Foram observados, predominantemente, na região posterior do corpo dos ácaros. Pelo tamanho e localização, sua presença deve interferir nas atividades normais de funcionamento dos órgãos do hospedeiro.
A formação de cristais é conhecida quase exclusivamente para ácaros infectados por vírus, contudo, ainda não havia sido observada para fungos. A presença de cristais é comum em Panonychus citri (McGregor) (Acari: Tetranychidae) infectados por um vírus não-incluso em pomares cítricos nos Estados Unidos. De acordo com BEAVERS & REED (1972) a infecção pelo vírus pode ser determinada montando-se os ácaros em meio Hoyer e examinando-os em microscópio de luz polarizada para a presença ou ausência de cristais birefringentes no interior dos ácaros. A observação dos cristais era de fundamental importância para a comprovação da infecção pelo patógeno, pois as partículas virais são muito pequenas e de difícil visualização. Estes cristais foram observados por TASHIRO & BEAVERS (1966) em 77% dos ácaros mortos pelo patógeno e 54% dos ácaros vivos infectados, durante uma epizootia. Inclusões birefringentes dentro do mesêntero de Panonychus ulmi (Koch) (Acari: Tetranychidae) foram observadas por BIRD (1967), quando os ácaros encontravam-se infectados por um outro vírus não-incluso. Na Europa existem suspeitas de que um entomopatógeno seja o responsável pela formação de cristais na forma de halteres na região posterior de Phytoseiulus persimilis Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae), capaz de comprometer sua reprodução, predação e longevidade (BJORNSON et al., 2000).
Nos estudos de infecção de Phyllocoptruta oleivora (Ashmead) (Acari: Eriophyidae) (MCCOY & COUCH, 1978; SOSA-GÓMEZ & NASCA, 1983) e T. urticae (GERSON et al., 1979) por Hirsutella thompsonii Fischer, não foram feitas pelos pesquisadores qualquer referência a possível presença de cristais nos ácaros infectados, mesmo quando descreveram com detalhes o processo de colonização dos ácaros por este fungo. O mesmo aconteceu para Neozygites floridana infectando os ácaros tetraniquídeos Eutetranychus banksi McGregor (SELHIME & MUMA, 1966) e T. urticae (CARNER, 1976).
Os fatores que envolvem a formação de cristais em ácaros ainda não são bem conhecidos, contudo, no estudo de NORTON & BEHAN-PELLETIER (1991) são propostas algumas hipóteses. Deposições de carbonato de cálcio e oxalato de cálcio foram observadas pelos autores em diversos pontos do tegumento de ácaros de solo (Acari: Oribatida), conferindo dureza ao tegumento, e desta forma, contribuindo para a sua defesa contra o ataque de seus predadores. A origem destes cristais foi discutida e sugerem, com base na literatura, que estes cristais são formados pela reação entre o ácido oxálico produzido durante o metabolismo de fungos decompositores com o cálcio presente na solução do solo. Para estes fungos, o ácido oxálico atua no processo não-enzimático de decomposição vegetal, sendo os cristais de oxalato de cálcio precipitados na superfície de suas hifas. Estas deposições de cálcio presentes sobre o tegumento dos ácaros derivam dos cristais originalmente precipitados pelos fungos no solo, este por sua vez, servem de alimento para estes ácaros.
Considerando que os fungos B. bassiana e M. anisopliae são também habitantes do solo, onde vivem dos componentes orgânicos deste ambiente, é provável que a origem dos cristais observados em T. urticae seja a reação entre o ácido oxálico produzido pelo metabolismo destes fungos, com o cálcio presente na hemolinfa do ácaro. Este tipo de cristal também foi observado por AMARAL & ALVES (1979) sobre o tegumento e na hemolinfa de Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) infectados por B. bassiana. Neste caso, a formação dos cristais pode ter ocorrido externamente pela reação do ácido oxálico com a cálcio polvilhado sobre os insetos, como prática usual dos produtores para prevenir a infecção dos insetos por este entomopatógeno. MOINO JÚNIOR (1998) observou a formação de reduzido número de cristais em locais de intenso crescimento micelial de B. bassiana sobre o tegumento do cupim Heterotermes tenuis (Hagen) (Isoptera: Rhinotermitidae).
Estudos detalhados são necessários para que possa ser elucidado o fenômeno envolvido na formação dos cristais de cálcio durante a colonização de insetos e ácaros por B. bassiana e M. anisopliae, bem como o papel destes cristais no ciclo das relações entre patógenohospedeiro.
A. aleyrodis e P. farinosus apresentam reduzida patogenicidade a T. urticae; Os valores médios de mortalidades corrigida e confirmada de T. urticae apresentados pelos isolados de B. bassiana, M. anisopliae e Hirsutella sp. são semelhantes; Os isolados CB 2, CB 146, CB 157, CB 161 e CB 166 de B. bassiana e os isolados CB 345, CB 348, 1247, 1286 e PL47 de M. anisopliae são altamente patogênicos e promissores para o controle microbiano de T. urticae; Todos os isolados de B. bassiana e M. anisopliae produzem cristais de cálcio no interior do corpo dos ácaros infectados.
Agradecemos ao CNPq-PRONEX e a FAPESP pelo financiamento desta pesquisa.
Recebido em 5/2/02 / Aceito em 30/4/02
M.A. Tamai (1), S.B. Alves (1), J.E.M. de Almeida (2), M. Faion (1)
sebalves[arroba]esalq.usp.br
1. Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola, ESALQ/USP, CP 9, CEP 13418-900, Piracicaba, SP, Brasil. E-mail: maatamai[arroba]carpa.ciagri.usp.br
2. Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Sanidad Vegetal, Instituto Biológico, ampinas, SP, Brasil.
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