FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS

NÚCLEO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE

CURSO DE BIOMEDICINA

PRISCILLA LIMA NÓBREGA
CRISTIANE ALVES
ELIZABETH LUCENA
ERIC D. MARIANO
PATRICIA DA SILVA GOLÇANVES
VERÔNICA LOPES

Análises dos processos referentes à extração de DNA com comparação dos protocolos com clorofórmio e sem clorofórmio

São Paulo, 2012
INTRODUÇÃO

Neste relatório analisamos os processos referentes à extração de DNA com comparação dos protocolos com clorofórmio e sem clorofórmio. O primeiro procedimento será a extração do DNA, onde adicionamos ao pellet Buffer A (TRIS 0,01M ph 8,0 / EDTA 0,002 M/ Nacl 0,04 M), cada componente da solução tem uma função especifica. O Tris funciona como solução tampão, estabilizando …exibir mais conteúdo…

Os componentes principais de um espectrofotômetro são apresentados e suas respectivas funções:
Fonte de Luz: é composta por uma lâmpada de deutério e uma lâmpada de tungstênio (semelhante à lâmpada de carro). A lâmpada de deutério emite radiação UV e a de tungstênio emite luz visível.
Monocromador: alguns espectrofotômetros ainda possuem um prisma como monocromador, porém os mais modernos possuem dispositivos eletrônicos que transformam a luz incidida em vários comprimentos de onda, em um só comprimento, ou seja, a luz monocromática.
Cubeta: é o recipiente propício para conter a amostra que será utilizada na análise, as cubetas podem ser de quartzo, vidro e acrílico, porém recomenda-se que seja usada uma cubeta de quartzo por que o vidro e o plástico absorvem UV e causa a reflexão da luz visível.
Detector: o detector é um dispositivo que detecta a fração de luz que passou pela amostra e transfere para o visor e para o computador acoplado ao aparelho.

Fig. 3

Espectrofotometria e quantificação
.Princípios de absorção da luz:
1. A absorção da luz é tanto maior quanto mais concentrada for a solução por ela atravessada (fig. 4):

Fig.4. Relação entre a concentração de uma solução e a luz absorvida. A solução 20g/l absorve o dobro da solução 10g/l.
2. A absorção da luz é tanto maior quanto maior for a distância percorrida pelo feixe luminoso através das amostras(fig. 5):

Fig.5. Relação entre a distância percorrida pelo feixe luminoso e a luz