Espectrofluorimetria
ESPECTROFLUORIMETRIA
São Paulo, setembro de 2014
UNISA- Universidade de Santo Amaro
QUÍMICA ANALÍTICA QUANTITATIVA E ANÁLISE INSTRUMENTAL
São Paulo, setembro de 2014
INTRODUÇÃO
Atualmente, inúmeros objetos e métodos essenciais no cotidiano, ao contrário do que muitas vezes se imagina, não foram inventados, mas descobertos, como a espectrofluorimetria, que é um método muito utilizado na área farmacêutica, por exemplo. Sua descoberta pode ser atribuída a diversos nomes, como Nicolás Monardes e Athanasius Kircher, porém o povo asteca, que viveu entre os séculos XIV e XVI, já observava fenômenos relacionados à …exibir mais conteúdo…
Isto ocorre porque a molécula está no estado excitado triplete, onde há um desemparelhamento nos orbitais eletrônicos e os spins passaram a estar paralelos. Na fluorescência a energia é emitida mais rapidamente pelo fato de a molécula estar num estado chamado estado excitado singlete, onde os orbitais eletrônicos estão emparelhados e os spins dos elétrons estão em direções opostas. A fluorescência ocorre com a liberação de energia que faz com que a molécula passe do estado excitado singlete para o fundamental singlete, onde a molécula se encontrava antes da absorção da energia que a excitou.
VANTAGEM E DESVANTAGEM
A fluorimetria tem como vantagens a elevada sensibilidade (cerca de 100 vezes maior do que a da espectroscopia UV-visivel), e a maior seletividade, já que nem todas as substâncias que absorvem radiação eletromagnética são capazes de emitir fluorescência, porém tem como desvantagem o fato de que o campo de aplicação se limitaria apenas a moléculas capazes de emitir fluorescência ou fosforescência.
INSTRUMENTOS PARA MEDIR A FLUORESCÊNCIA
Os instrumentos utilizados para medir a fluorescência são genericamente chamados de fluorômetros ou fluorímetros. Dividem-se em fluorímetros de filtro e espectrofluorímetros conforme