Escola Secundária de Caneças
Biologia 12º Ano
Laboratório da Lusófona

Clonagem de genes e DNA Fingerprint

Caneças, 12 de Fevereiro de 2012
Índice

Fundamento Teórico 4

• Clonagem de genes: 4

• DNAFingerprint 5

Material 7

• Clonagem de genes: 7

• DNA Fingerprint: 7

Procedimento experimental 8

• Clonagem de genes: 8

• DNAfingerprint: 8

Resultados 9

• Clonagem de genes: 9

• DNAFingerprint: 9

Discussão de resultados 10

Conclusão 12

Bibliografia 13

• Impressa: 13

• Informática: 13

Introdução

A visita de estudo realizada no dia 1 de Fevereiro de 2012 à Universidade Lusófona foi feita no âmbito da matéria …exibir mais conteúdo…

Foram colocados os eppandorfs no gelo para se dar a reacção de transformação (formação de DNArecombinante).

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Os eppandorfs são submetidos a um banho-maria de 42oC para haver a realização de um choque térmico na célula que vai fornecer assim uma certeza de que houve a quebra das ligações entre as cadeias de DNA. Aos dois eppandorfs foi adicionado LB (meio nutritivo completo) para haver uma boa multiplicação das bactérias e de seguida submeteu-se a um banho-maria de 37oC (ajudar no bom desenvolvimento das células). No final as soluções foram adicionadas a três tipos de meio de cultura diferente em que um continha LB (1º), outro LB + Ampicilina (2º) e outro continha LB + Ampicilina + Arabinose (3º). O primeiro meio de cultura serviu para amostra de controlo, isto é, para comparar os outros dois meios de cultura. O segundo meio serviu para observar a quantidade de células que tinham ficado com o plasmídeo, pois este como é resistente aos medicamentos mantém as bactérias vivas. O terceiro meio de cultura serviu para ver o que se observou no segundo meio de cultura e para observar a fluorescência que o plasmídeo pGlo faz quando está represente a arabinose. Isto só acontece porque a arabinose é um açúcar e neste caso é o operão que vai transcrever o DNA do plasmídeo. Este operão (operão ara), é indutível porque a presença de arabinose induz a transcrição, de outro modo, a arabinose funciona como um