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PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE MINAS GERAIS
Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde
Curso de Ciências Biológicas

BIOLOGIA MOLECULAR
Relatórios de Aulas Práticas
Clonagem

Belo Horizonte

2009

RELATÓRIOS DAS PRATICAS 10, 11, 12,13.

TÍTULO: Clonagem – Visualização prática

OBJETIVO Através da prática, conhecer experimentalmente a técnica de clonagem, que diferentemente da técnica de PCR, a amplificação in vivo não é uma reação enzimática. Conhecer as etapas envolvidas, seus constituintes, o princípio e a importância desse método utilizado na Biologia Molecular.

INTRODUÇÃO Nas últimas décadas, com o desenvolvimento da Biologia Molecular e das demais áreas …exibir mais conteúdo…

Segundo Moreira e Mendes (1998) o vetor é um elemento genético auto-replicante (vírus ou plasmídio) que funciona como um veículo transportando o gene de interesse para o interior da célula hospedeira. Dentro da célula o vetor multiplica-se produzindo numerosas copias de si e do gene inserido. Após grande numero de divisões celulares, é produzido uma colônia composta por clones contendo uma ou mais copias da molécula de DNA recombinante (MOREIRA & MENDES, 1998). O gene transportado pela molécula recombinante é assim conhecido como sendo clonado.

Transformação A transformação genética, segundo BELO (2006), pode ser definida como a incorporação estável e hereditável de DNA exógeno por células de um hospedeiro. A transformação ocorre naturalmente em algumas bactérias, o que contribui para o aumento da variabilidade genética das populações. (...) Transformação é um processo pelo qual DNA é transferido para o interior de uma célula bacteriana. A transformação natural é um evento raro. A maioria dos métodos de transformação de bactérias são baseados no fato de que células bacterianas tratadas com CaCl2 sofrem modificações estruturais na parede celular e tornam-se capazes de absorver DNA em solução quando submetidas a um choque térmico. O tratamento com CaCl2 é mais eficiente durante a fase lag de crescimento. As células tratadas dessa forma são denominadas “competentes”, porém tornam-se extremamente sensíveis a qualquer