PRÁCTICA 6

MEDICIÓN DEL PORCENTAJE DE RAMIFICACIÓN Y DEL NÚMERO DE UNIDADES DE GLUCÓGENO.

INTRODUCCIÓN: El glucógeno, forma de almacenamiento de la glucosa, es un polisacárido ramificado de glucosa compuesto de cadenas de unidades glucosilo unidas por enlaces -1,4 con ramificaciones -1,6 cada 8-10 residuos. En esta molécula tan ramificada sólo un residuo de glucosa presenta su carbono anomérico libre (no está unido a otro residuo de glucosa). La estructura ramificada del glucógeno permite su rápida síntesis y degradación dado que las enzimas que lo metabolizan pueden actuar sobre varias cadenas simultáneamente dado que presenta múltiples extremos no reductores. Las enzimas involucradas en su metabolismo y algunas de las …ver más…

3. Ya teniendo homogenizada la muestra con glucógeno se añadió 10 ml de peryodato.

4. Agregándole 20 ml de agua destilada para que se aforara a 50 ml; tapándose el matraz con papel aluminio.
5. Se tuvieron que repetir los pasos para muestra testigo pero sin tener que colocarlo en baño maría.
6. Guardándose en el refrigerador cuidando que no les entrara luz a la muestra problema y la testigo.

7. En la siguiente semana se procedió preparándose con la muestra problema obtenida anteriormente tomando 5 ml de muestra problema en un matraz, agregándosele 3 gotas de etilenglicol, repitiéndolo dos veces con la muestra problema.
8. En el caso de la muestra testigo se repitió exactamente lo mismo.

9. Tapar con aluminio, tapar y guardar, esperando 15 minutos.

10. Titulándose con hidróxido de sodio 0.10 N tanto las dos muestras problemas como la testigo, se utilizó como indicador fenolftaleína.

RESULTADOS:

Puesto que existe “n” cadenas de ramificación

NÚMERO DE SEGMENTOS DE LA MUESTRA

Este número es aproximadamente igual al número de moléculas no reductoras y es igual al número de puntos de ramificación más 1. Suponiendo un peso molecular de 162 x 106 de glucógeno, existen por lo tanto 10,000 unidades de glucosa por mol de