DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES POR LA TÉCNICA DE MILLER (DNS)

Resumen
En la presente práctica se llevará a cabo la determinación de azúcares reductores. La cantidad de azúcares reductores se determinará colorimétricamente aplicando el método del ácido dinitrosalicílico (DNS) a una gama de soluciones patrón de glucosa, a objeto de obtener la correspondiente curva de calibrado.
Palabras clave: carbohidratos, azucares reductores, método colorimétrico.
Abreviaturas empleadas: DNS, ácido dinitrosalicílico. 1. Introducción y objetivo

Los carbohidratos son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxigeno. Todos los carbohidratos son azucares pequeños, solubles en agua (glucosa y fructosa, por ejemplo) o bien cadenas, como el …ver más…

La Grafica 1 muestra la curva patrón obtenida a partir de los datos experimentales (los valores representados son el promedio de las absorbancias por duplicado); ajustándola a la recta se obtuvo la ecuación:

y= 0.0442x – 0.0508

donde la pendiente (m) es 0.0442 y la ordenada al origen (b) es 0.0508.

R = 0.9921

5. Discusión
La absorbancia es directamente proporcional a la concentración del material que absorbe la luz

6. Cuestionario 1. Explique el fundamento de la técnica de DNS.
Se basa en la reducción del DNS (de color amarillo) por la glucosa u otro azúcar reductor al ácido 3-amino-5-nitrosalicílico (de color rojo), cuya presencia puede detectarse por lectura de la Absorbancia en la zona de 540-570nm.

2. ¿Para que se utiliza el NaOH, el fenol y el sulfito de sodio en la técnica de DNS?

Los carbohidratos son particularmente sensible a ácidos fuertes y altas temperaturas. Bajo estas condiciones una serie de reacciones complejas toman lugar empezando con una deshidratación simple, si se continúa el calentamiento y la catálisis ácida se producen varios derivados del furano que condensan consigo mismos y con otros subproductos para producir compuestos coloridos producto de la condensación de compuestos fenólicos y con heterociclos con el nitrógeno como heteroátomo. La condensación más común es con fenol. Este método es fácil, eficaz y rápido. Todos los azúcares como oligosacáridos y polisacáridos