CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS NO. 3

PROCESAR TÉCNICAS BACTERIOLÓGICAS BÁSICAS

PROYECTO DE AULA
“TÉCNICAS PARA IDENTIFICAR COCOS Y BACILOS GRAM POSITIVOS DE INTERÉS MEDICO”

INTEGRANTES:

SEMESTRE:
3°AV LABORATORIO CLÍNICO

OBJETIVO
Aprender a diferenciar bacterias Gram positivas de Gram negativas utilizando la técnica de tinción de Gram e identificar su morfología, así como también conocer en que medios podemos encontrarlas.

INTRODUCCION
En microbiología, se denominan bacterias Gram positivas a aquellas bacterias que se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram: de aquí el nombre de "Gram-positivas" o también "grampositivas". Esta característica Química está íntimamente ligada …ver más…

Realizar un raspado con un asa bacteriológica esterilizada con la llama del mechero de la muestra de la que se realizara el frotis.

Realizar el frotis de forma uniforme sobre el portaobjetos con el asa y dejar secar.

Una vez seco sellar el frotis con la llama del mechero.

TINCION
Material para realizar la Tinción de Gram:
Colorante cristal violeta
Colorante de contraste safranina
Mordiente (lugol)
Alcohol-acetona
Puente de tinción
Aceite de inmersión

Desarrollo:
Colocar sobre el frotis una pequeña cantidad de cristal violeta al 1% ayudándose de un gotero dejándolo actuar por 1 minuto.

Enjuagar con agua corriente, teniendo cuidado que el chorro de agua no debe de caer directamente sobre la muestra, el portaobjetos debe de estar inclinado hacia abajo.
Una vez enjuagado se agrega el lugol que es un mordiente durante 1 minuto.

Decolorar rápidamente con alcohol-cetona.

Enjuagar con agua corriente.
Agregar el colorante de contraste que es la safranina por 30 segundos.

Enjuagar con agua corriente y dejar secar a temperatura ambiente.
Finalmente coloque una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la preparación seca y haga la observación al microscopio con el objetivo de 100X.