Artigo

A Coloração de Gram e as Variações na sua Execução
Valdionir da Rosa Freitas, Simone Ulrich Picoli Centro Universitário Feevale – Laboratório de Biomedicina

Resumo
A coloração de Gram é um importante teste realizado nos laboratórios de microbiologia, sendo um recurso auxiliar no diagnóstico de doenças bacterianas. A partir de um determinado perfil tintorial as bactérias coram-se de roxo ou de rosa e conseqüentemente são classificadas como Gram-positivas ou Gram-negativas, respectivamente. A coloração de Gram envolve uma série de procedimentos antes de chegar à etapa final de leitura da lâmina preparada: envolve a confecção do esfregaço, sua fixação e passa pela coloração propriamente. Nesta, o corante Cristal Violeta …exibir mais conteúdo…

Nesse sentido, este trabalho se propôs a verificar se estas pequenas variações de tempo e lavagens a partir de protocolos específicos refletem em alguma alteração na interpretação dos resultados da coloração de Gram.

Materiais e Métodos
Inicialmente, foi realizada a documentação da técnica da coloração de Gram executada por diferentes laboratórios, bem como a aquisição de protocolos das bulas de diferentes kits de Gram e de protocolos da literatura vigente. Foram obtidos 13 protocolos de Gram dos quais 10 eram discrepantes. As técnicas que apresentaram diferenças entre si encontram-se resumidas na Tabela 1. Posteriormente, foi feita a inoculação de cepas padronizadas (American Type Culture Colection – ATCC) de Escherichia coli ATCC 25922 e Staphylococcus aureus ATCC 25923 em Caldo Soja Triptona (TSB). Estas foram incubadas em estufa, 37ºC, durante 24 horas. As cepas de referência foram utilizadas porque possuem um comportamento frente ao Gram que é

Tabela 1. Levantamento de diferentes técnicas de coloração de Gram. Cristal Violeta Lavagem H2O/lugol# Lugol Lavagem H2O Álcool-acetona Lavagem H2O Fucsina Gram Sim 1 min Sim * Sim 20 s Sim 1 min Sim * Sim 30 s Sim 1 min Sim * Sim 1 min Não 1 min Sim * Sim 30 s Não 1 min Não * Sim 30 s Não 1 min Não * Sim 30 s Não 1 min Sim * Sim 20 s Não 1 min Sim * Não 30 s Sim# 1 min Não * Sim 30 s Sim# 1 min