informe de la actividad proteolitica de la papaina
(Informe de bioquímica)
Jhon Jairo Basto Vega
Resumen
El objetivo principal de la práctica es el de reconocer la actividad proteolítica de la papaína, por medio de análisis cualitativos (esto se comprueba al observar los coágulos que forman las proteínas de la leche y que indican la actividad de esta enzima), y además verificar in vitro que efectos tienen algunos compuestos químicos o inhibidores, para entender que propiedades físicas o químicas varían después de reaccionar con distintos reactivos.
Para la realización de dicho objetivo se utilizaron como herramientas, distintos reactivos químicos e inhibidores como: el HCl y NOH (para identificar en …ver más…
La papaína posee propiedades físicas y químicas como: un punto isoeléctrico de 8.75, un coeficiente de extinción molar de 2.5 mL mg-1 cm-1 a 278 nm, también contiene 212 aminoácidos (su N y C-terminal la isoleucina y la asparagina respectivamente) en su estructura (fig 1) los que le dan un peso molecular de 23.000 daltons, su pH óptimo está en un rango entre 3 – 9 que varía, pero su máxima actividad catalítica se encuentra entre 5,0 a 6,0 siendo su temperatura óptima de 37ºC (Chaverry,A.1983). Muchos de los científicos que han trabajado con esta enzima han descubierto que la papaína se activa por cisteína, sulfuros y sulfitos. Su velocidad catalítica se incrementa cuando algún quelante, como el EDTA se encuentra presente en el medio de reacción. La papaína pierde su actividad catalítica cuando hay presencia de metales pesados y reactivos carbonilos estos inhibidores convierten a los grupos sulfidrilos en inactivos, es decir, la enzima se desnaturaliza porque pierde su estructura terciaria, que es la que en definitiva le da la función. Sin esta conformación tridimensional no se forma el sitio activo, razón por la cual no presenta actividad alguna. A la larga se está inhibiendo a la enzima, pero los inhibidores enzimáticos son aquellos que se unen a la enzima, ya sea en su sitio activo o en un sitio modulador y afectan la actividad de la enzima reduciéndola o haciéndola nula. Este pedazo sobra recuerde nunca