SEDE MEDELLÍN

VIABILIDAD CELULAR Y RECUENTO EN CAMARA DE NEUBAUER

Isabel Cristina Ortega B.

Estudiante Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín icortegab@unal.edu.co Mayo 19, 2011

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Resumen La viabilidad celular es una determinación de las células vivas o muertas, en base a una muestra total de células. En este informe se muestran los resultados de la determinación de la concentración y viabilidad de varias muestras de distintas células. Dichas muestras fueron: una línea celular establecida Jurkat que al agregarle azul de tripano solo se teñían las células que …ver más…

Las células que aparecen en el microscopio, de color azul, son consideradas no viables. [1] 2. Materiales y métodos A. Línea Celular Jurkat Materiales * Cultivo madre en T25 * Solución Salina * Azul de tripano * Centrifugadora * Tubo cónico * Cámara de Neubauer Procedimiento Se toma el cultivo madre de que esta en un T25, este se vierte en un tubo cónico y se centrifugo a 2400rpm durante 4 minutos. Se descarta el sobrenadante y deja solamente el pellet, este se resuspende en 1ml de solución salina. En cada espacio de la cámara de Neubauer, se colocan 20μL de las células resuspendidas y 20μL de azul de tripano. Con el microscopio invertido se realiza el conteo celular por exclusión. Las que fueron teñidas son aquellas no viables. B. Células Sanguíneas Materiales * Muestra de sangre * Solución Salina * Cámara de Neubauer Procedimiento Se realiza una dilución de 1/100 en solución salina. Luego se le agrega a la cámara de Neubauer 10μL de la sangre diluida y por último se realiza el conteo de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en el microscopio con un contador. C. Semen bovino Materiales * Pajilla de bovino * Cámara de Makler

Procedimiento Se agregan 10μL de semen en la cámara de Makler y se hace la observación en el microscopio invertido. Lo que se mira principalmente es el vigor, la movilidad y la