Reacción de la cadena de la polimerasa (PCR)

La reacción de la cadena de la polimerasa o conocida como PCR por sus siglas en inglés (Polymerase Chain Reaction), es una técnica de biología molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo.
Su utilidad es que tras la amplificación de mucho más fácil identificar con una muy alta probabilidad, virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadáveres) o hacer investigaciones científicas sobre el ADN amplificado.
Ciclo de amplificación
El ADN que se amplifique se mezcla con desoxirribonucleótidos, una polimerasa de ADN estable térmica llamada Taq polimerasa y …ver más…

Actúan como cofactores de la polimerasa. * Iones monovalentes, como el potasio. * Una solución tampón (buffer) que mantiene el pH adecuado para el funcionamiento del ADN polimerasa. * ADN polimerasa o mezcla de distintas polimerasa con temperatura optima alrededor de 70ºC * ADN molde, que contiene la región de ADN que se va a amplificar. * Termociclador, el aparato que va a mantener la temperatura necesaria en cada una de las etapas que conforman un ciclo.
Tipos de PCR
PCR anidada: el producto de una amplificación es utilizado como molde para realizar una segunda amplificación con cebadores que se ubican dentro de la primera secuencia amplificada. La especificidad es aumentada y así evitamos posibles hibridaciones. La desventaja es que no nos permite cuantificar la muestra.
PCR in situ: Es una reacción de PCR en secciones histológicas o células, donde los productos generados pueden visualizarse en el sitio de amplificación. Es realizada sobre preparaciones fijas en un portaobjetos.
PCR múltiplex: se amplifica más de una secuencia en una misma reacción. Emplea dos o más pares de cebadores en un único tubo con el fin de amplificar simultáneamente múltiples segmentos de ADN. Sus ventajas son se obtiene la información de varios loci en una sola reacción, menor cantidad de molde para el análisis, menor cantidad de reactivos, rápida construcción de base de datos.
PCR con