Práctica De Obtención De Suero Y Plam
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PRÁCTICA 12: MUESTRAS DE SANGREFUNDAMENTO:
Obtener a partir de la sangre total los diferentes componentes de la sangre donde realizar los estudios pertinentes.
MATERIAL:
Gradilla
Tubos con muestras sanguíneas
Centrífuga
Baño termostatazo
Agitador
Tubos de Eppendorf
Pipetas pasteur
Papel de paraflim
Tubos de hemólisis
Etiquetas o rotulador de vidrio
TÉCNICA:
Tubo sin anticoagulante: Se utiliza para pruebas bioquímicas. Obtención de SUERO. 1. Dejar a Tª ambiente que se coagule 30-120 min o 2. Meter al baño María (37º) durante aproximadamente 20-30 min hasta conseguir la formación del coágulo. 3. Centrifugar a 5000 rpm durante 5 min o a 3000 rpm durante 10 min. 4. Una vez realizada esta operación, …ver más…
1. Mezclar suavemente. 2. Centrifugamos rápidamente (antes de 30 min) desde la extracción. 3. Se puede obtener: a. Plasma pobre en plaquetas (PPP). Para realizar estudios de coagulación. i. Realizamos una centrifugación suave a 1000 rpm durante 10min, tras la cual separamos el sobrenadante (plasma) con una pipeta Pasteur y lo trasferimos a un tubo de hemólisis o eppendorf. b. Plasma rico en plaquetas (PRP). Para realizar estudios plaquetarios. i. Realizamos una justificación intensa de la muestra, 3000-3500 rpm durante 10min, después retirar rápidamente el sobrenadante y trasferir a un tubo adecuado. 4. Si el procesamiento de la muestra se retrasa, ésta debemos conservarla en nevera, para evitar la pérdida de algunos factores de coagulación. Estabilidad de la muestra hasta 12 horas refrigerada y hasta 1 mes congelada (-20ºC).
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Para realizar pruebas de coagulación el paciente debe de estar en ayunas, los alimentos grasos producen alteración en la formación del coágulo. También debe evitar tomar ciertos fármacos por lo menos las 2 semanas previas al análisis.
OBSERVACIONES SOBRE ALMACENAMIENTO:
Los cambios que ocurren en los especimenes de sangre durante el almacenamiento pueden clasificarse de la siguiente manera: 1. Efectos asociados al intercambio gaseoso: el contacto de los especimenes de sangre con el aire ocasiona cambios en las presiones parciales de CO2, O2 y de pH