LA LOCALIZACIÓN DE Mg-Na-K ACTIVO
TRIFOSFATO DE ADENOSINA
EN LAS MEMBRANAS FANTASMAS DE GLÓBULOS ROJOS.

VINCENT T. MARCHESI y GEORGE E. PALADE

RESUMEN

El método de la sal de plomo introducida por Wachstein y Meisel (12) para la demonstración citoquímica de la actividad de ATPasa fue modificada y usada para determinar los sitios de actividad en las membranas fantasmas de los glóbulos rojos. Estudios preliminares mostraron que la fijación de aldehído y concentraciones estándar de la captura del reactivo Pb(NO2)2 resultaron en una marcada inhibición de la actividad de estas membranas. Al reducir la concentración de Pb2+ e incubando glóbulos rojos fantasmas no fijados, más del 50% de la actividad total de ATPasa, el cual incluía …ver más…

Hemos elegido los glóbulos rojos fantasmas como un sistema experimental ya que consisten en una única membrana y puede ser preparada fácilmente, y ya que su actividad de ATPasa permanece estable por períodos relativamente largo. Aunque comparado con otro tejidos (13) los glóbulos rojos no son particularmente activos, su actividad ATPasa es bien caracterizada y su membrana representa un sistema en el cual la correlación entre transporte activo y la actividad de ATPasa es razonablemente segura (1, 2, 10). Para estos estudios, una preparación estándar de glóbulo rojo fantasma fue hecha a partir de sangre de conejillo de india y los experimentos fueron llevados a cabo de manera de que las condiciones más favorables podían ser determinadas para la demonstración citoquímica de tanto Mg- y Na-K-ATPasas. Las respuestas del sistema del glóbulo rojo fantasma a la prefijación por aldehídos y a la presencia de metales pesados usados como reactivos de captura fueron investigadas a la luz de los reportes descritos anteriormente. Además, en vista de los datos disponibles en la