MICROSCOPIA CONFOCAL

Dr. Carlos Sánchez Martín Servicio de Microscopía Optica y Confocal Centro de Biología Molecular Severo Ochoa Universidad Autónoma de Madrid

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1. INTRODUCCIÓN Y ANTECEDENTES............................................................................................................. 3 2. TIPOS Y CARACTERISTICAS............................................................................................................................ 4 3. VENTAJAS Y DESVENTAJAS ............................................................................................................................ 8 4. ASPECTOS PRACTICOS …ver más…

Existen dos modalidades: el Láser Scanning Confocal Microscopy (LSCM) (de “Escaneo de láser”) y el Stage Scanning Confocal Microscopy (SSCM) (de “escaneo de platina”); 2) Multi-haz, que incluye Disc Scanning Confocal Microscopy (DSCM) (de “Escaneo de disco”).

Stage Scanning Confocal Microscopy (SSCM) Es el modelo inicialmente diseñado por Marvin Minsky. En este caso se emplea una haz de láser fijo y la preparación se “rastrea” mediante la utilización de una platina motorizada en el microscopio. Esto supone una adquisición lenta de imágenes (alrededor de 10” por imagen adquirida) y, por tanto, su uso se limita a preparaciones biológicas fijadas y en la microelectrónica. Presenta como principal ventaja el permitir la observación de una zona tan grande como se desee sin tener que ceñirse al campo visual del objetivo. Por otra parte, debido a que el haz permanece estacionario, se tiene una iluminación axial constante, lo que minimiza las aberraciones debidas al objetivo y al condensador, proporcionando la misma respuesta óptica a lo largo de todo el campo de muestra. La utilización de un láser como fuente de luz permite enfocar la iluminación en una región muy pequeña de la muestra y con una gran intensidad.

Láser Scanning Confocal Microscopy (LSCM) Es con diferencia el más utilizado en Biología. En este caso el barrido de la preparación se