Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Laboratorio de Genética microbiana

Práctica: Caracterización fenotípica y física de DNA recombinante.

Equipo: 9

Alumnas:

Navarro Hernández Itze Cecilia

Porras Martiñón Emma Nohemí

Ortega Lozano Tania Janet

Sección: 2 Grupo: 5QM1

Introducción:

La ingeniería genética es el conjunto de técnicas empleadas para introducir DNA foráneo a una célula y lograr que replique y exprese [Luque, J. y A. Herráez. 2001]

* Introducir genes (normalmente de otro ser vivo) en un genoma. * Eliminar genes. * Modificar su secuencia de bases * Secuenciar genes * Clonar genes

Si aplicamos estos métodos y técnicas a los seres …ver más…

Clonación del ADN
Para manipular el ADN es necesario disponer de una gran cantidad de moléculas. Esto se consigue con la clonación. Se puede hacer de dos formas: * Clonación molecular o génica, utilizando células. * Amplificación por PCR, sin utilizar células.

Clonación molecular o génica
La clonación molecular se hace utilizando células hospedadoras, bacterias normalmente. Es decir, se inserta el ADN deseado en su ADN y cuando la bacteria se reproduzca hará múltiples copias de ese ADN.
Para ello, una vez aislado el ADN hay que insertarlo en el ADN bacteriano. Para ello se utilizan los vectores de clonación o de clonado. Estos vectores son pequeños moléculas de ADN que tienen capacidad de autorreplicación independientemente del ADN de la célula huésped, como plásmidos, bacteriófagos y cósmidos. El gen deseado hay que insertarlo primero en estos vectores.
Estos vectores llevan además unos genes llamados marcadores que sirven para detectar o identificar las células que han incorporado los vectores. Estos marcadores son genes de resistencia a antibióticos (si se inserta en una bacteria) o genes de bioluminiscencia (si se inserta en una eucarionte). Los plásmidos naturales no tienen estos marcadores, sino que se añaden artificialmente [Freifelder, D. 1987].
Para lograr en el inserto en la célula huésped se logra de la siguiente manera: Se corta el ADN del vector y el que contiene el gen deseado con la misma restrictasa y luego se unen con la ligasa.