INTRODUCCIÓN

En la realización de un perfil lipídico de determina el colesterol total y sus fracciones , así como los triglicéridos en la rutina diaria del laboratorio clínico. El colesterol es un esteroides que se encuentra distribuido en casi todas las membranas celulares del organismo animal especialmente en tejido nervioso.
La mayor parte del colesterol del organismo se origina por síntesis (≈1g/dia) y una pequeña cantidad (≈0.3g/dia) es suministrado por los alimentos de la dieta, principalmente carne, hígado, sesos yema de huevos. Se sintetiza principalmente en hígado, corteza suprarrenal, piel e intestino. En el organismo se encuentra bajo dos formas químicas: colesterol libre y colesterol esterificado e su grupo 3-OH con ácidos …ver más…

Sin no cumplen este requisito no deben usarse para determinar colesterol y HDL-Colesterol.

El colesterol en suero o plasma es estable:-Por 5 días a temperatura ambiente.-2 semanas refrigeradas-6 meses si se congela.NOTA: el HDL-colesterol no debe congelarse para es estable hasta 5 días refrigerado.Limitaciones del Método.
-Niveles de ácido ascórbico tan altos como 10 mg %, No Interfieren en la prueba-El presente método de Colesterol, á demostrado ser lineal hasta 500 mg/dl. Mas allá de este límite, las muestras deberán diluirse con solución salina (0,85%) y ensayadas nuevamente. El nuevo resultado deberá multiplicarse por el factor de dilución.
Procedimiento del método.
1.- Se marcaron 3 tubos: una para la muestra (M), otro para el estándar (St) y otro para el blanco reactivo (BR).2.- A cada tobo marcado se le agrego 1 ml de reactivo de colesterol y lleve a temperatura de reacción.3.- Se pipetea 10ul (0,010ml) de cada muestra o 50ul de sobrenadante de HDL-colesterol, al tubo de muestra. Se tapa y mezcla por inversión.4.- Se pipetea 10ul de estándar de colesterol y se agrega en el tubo rotulado para el estándar. Se tapa y mezcla por inversión.5.- Se incuban todos los tubos a 37º C por 5 min o 15 min a temperatura ambiente.6.- Después de la incubación se mezclan todos los tubos por inversión y lea dentro de los 30 min siguientes.7.-Leer a 500nm. Se lleva a 0 con