Aislamiento y Purificación de la Proteínas de la Leche α- Lactoalbumina

Cristóbal Dünner

I- Introducción
La preparación pura de una proteína es esencial antes de determinar sus propiedades, estructura y composición, por lo que es necesario aislarla y purificarla. Los métodos de separación de proteínas aprovechan propiedades tales como la carga, tamaño y solubilidad, que varía entre una y otra proteína (1). Las proteínas globulares son solubles porque sus residuos de aminoácidos polares, ácidos y básicos establecen interacciones con el agua. Cualquier agente que interrumpa estas interacciones proteína-agua disminuirá la …ver más…

El volumen para la muestra 2 fue de 10 µl para realizar la medición en el espectrofotómetro, pero según la curva estándar las muestras estarían en µg/ml. Por lo que al realizar la regla de tres se obtiene:
1.442 ------------ 1000µl
X --------------- 10 µl Es decir la concentración fue de 0,0144 ug/µl para la muestra 1. Se realizó el mismo para cada muestra pero se vario el volumen para las muestras 4 y 5 con 20 y 50 µl respectivamente (Tabla 4).

Con los datos obtenidos en III.1 se presenta la siguiente tabla N°2
Tabla N°2: Se muestran los datos resultantes utilizados luego para ser medidos en el espectrofotómetro: a 595 nm.
Luego se procedió a de medir la absorbancia para las muestra 1 a 5.
Con estos datos analizados en sección III.3 se determinó concentración de la proteína para cada una de las muestra mediante la curva estándar detallada más abajo.

Tabla N°3: Se muestra los valores de absorbancia para las muestras 1 a 5

Luego con la grafica obtenida en el trabajo practico N°1 se procedió a determinar las concentraciones α- albumina de cada muestra en sus diferentes etapas.

Grafico N°1. Curva de Calibración mediante el uso de BSA (Trabajo practico N°1)

Grafico N°1: Curva de Calibración. En eje y se observa la