Actividad enzimática de la β-galactosidasa de E. coli a diferentes temperaturas, valores de pH y diferentes concentraciones de sustrato
Sánchez Páez Juan Carlos
Laboratorio de Bioquímica, Departamento de Biología, Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.
26 de enero del 2013
Resumen
Se quiso demostrar que la β-galactosidasa es una enzima con comportamiento típico de Michaelis-Menten y ver cómo se comporta la actividad enzimática a diferentes valores de pH y temperatura, para lo cual se elaboraron varias muestras en tubos de ensayos donde se variaban primero la concentración de sustrato y se dejaban las demás variables constantes para agregar un extracto de E. coli con la enzima, dejando tiempo de que …ver más…
Los cambios controlados de estos factores y la medición de su efecto sobre la velocidad de la reacción proporcionan información sobre los mecanismos de catálisis. (Moreno, 2012)
La actividad enzimática se ve afectada por dichos factores cuando las propiedades de la enzima se ven perturbadas por ellos, esto es debido a lo relacionado que están las propiedades de una enzima con su estructura, es decir que las modificaciones en la estructura de la misma suele venir asociado a cambios en la actividad catalítica, como por ejemplo, las variaciones en la temperatura o cambios de pH, modifican la estructura enzimática y eso altera la velocidad de reacción. (Fundación H. A. Barceló - Facultad de Medicina, 2008) La mayoría de las reacciones enzimáticas sencillas pueden describirse con la ecuación de Michaelis-Menten, con dos parámetros, la constante de Micaelis Km, y el numero de recambio Kcat, la constante Km mide la concentración de sustrato a la cual la velocidad de reacción es Vmax/2, el numero de recambio mide la velocidad del proceso catalítico, mientras que la relación Kcat/Km es una medida de la eficiencia enzimática, La velocidad V indica el número de moléculas del sustrato que se convierten en producto por segundo;