Introducción:
Los lípidos pueden clasificarse en lípidos neutros,
como acilgliceroles y ésteres de colesterol, y
lípidos anfipáticos, los cuales están
compuestos por una porción polar y otra no polar, como
fosfolípidos y colesterol libre. Dada su estructura
molecular, son sustancias poco solubles en solventes polares, lo
que permite aislarlos de los tejidos fácilmente utilizando
solventes orgánicos.
Para separar los lípidos de una muestra se utilizan
habitualmente técnicas cromatográficas, como la TLC
o cromatografía en capa delgada. La misma puede realizarse
en forma monodimensional o bidimensional, dependiendo de la
naturaleza del compuesto a separar. Para separar
fosfolípidos individuales se utiliza la
cromatografía bidimensional en placas de sílica gel
60 en soporte de vidrio, utilizando como solvente de corrida una
mezcla de solventes orgánicos alcalinos en la primer
dimensión y una mezcla a pH acido en la segunda,
distinguiéndose bandas correspondientes a
fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol,
fosfatidilserina, ácido fosfatídico, etc.
La cromatografía monodimensional en palca de sílica
gel 60 se utiliza en cambio para la separación de
acilgliceroles, pudiéndose identificar bandas
correspondientes a monoacilglicerol, 1,2 diacilglicerol, 1,3
diacilglicerol y triacilglicerol. Para la identificación
de los compuestos en ambas técnicas se utilizan patrones
conocidos y se revelan mediante la exposición de las
placas a vapores de iodo (I2 ), los cuales colorean las distintas
bandas permitiendo su visualización.
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Fabian
Shalom