Introducción
El cáncer colorrectal hereditario no poliposo se
caracteriza por presentar una herencia autosómica dominante, los órganos
frecuentemente afectados por este tipo de cáncer son el
endometrio, el estomago, sistema biliar y
pancreático, y el tracto urinario.
En esta enfermedad los familiares de primer grado de un
paciente CCHNP tienen un 50% de riesgo de portar
uno de los genes que predisponen a la enfermedad; la
penetración es cercana al 80% por lo que alrededor del 20%
de los individuos que tienen la mutación que predispone a
esta condición, no desarrollarán el
cáncer.
El cáncer (HNPCC) esta caracterizados por
mutaciones que afectan a la línea germinal de un grupo de genes
muy importantes para la manutención de la estabilidad
genómica durante la replicación del DNA, estos
genes son conocidos como genes reparadores de DNA o genes de
mismatch repair (MLH1, MSH2, PMS2, PMS1, MSH6, TFGBR2 y MLH3). La
expresión de estos genes se traduce en el desarrollo de
un grupo de enzimas que
actúan como reparadores o correctores de bases mal
apareadas, causadas por la DNApolimerasa.
En sitios de división celular activos
(epitelios, médula ósea, etc.) es frecuente que
ocurran errores durante la replicación del ADN que son
reparados regularmente por estas enzimas, por lo cual son sitios
propensos a generar este tipo de cáncer frente a un
background genético determinado. De todas formas para el
desarrollo del cáncer es necesaria una segunda
mutación en el otro alelo del gen que codificaría
la enzima reparadora MMR.
Los microsatélites son secuencias repetitivas de
1 a 4 pb dispersas por todo el genoma especialmente en secuencias
intronicas, en estas secuencias repetitivas se producen
deleciones o amplificaciones debidas a errores de
replicación por la DNApolimerasa.
El DNA tumoral generalmente muestra
alteraciones en microsatélites (MSI) indicando un defecto
en el sistema de MMR, esto conlleva a una rápida
acumulación de mutaciones somáticas en oncogenes y
genes supresores de tumores.
Una de las mutaciones mas frecuentes asociadas al
HNPCC esta asociada al gen hMLH1, la cual implica la delecion de
3 bases en el exon 16, provocando la delecion en una lisina,
provocando una proteína inestable y por lo tanto
inactiva.
En pacientes con familiares de primer grado afectados
por HNPCC, puede realizarse un screening por PCR de de dicha
mutación en el exon 16 del gen hMLH1. En este caso
realizamos una PCR donde amplificamos el exon 16 y luego
realizamos una corrida electroforetica en gel de polyacrilamida
donde podemos diferenciar en individuos heterocigotas para dicho
gen la presencia de dos bandas, si bien la resolución por
gel de polyacrilamida no nos permite diferenciar bandas con 3
bases de diferencia, en este caso encontramos tres variantes de
amplificación, una posibilidad es encontrar bandas doble
cadena del gen WT/WT, otra posibilidad es MUT/MUT, estas bandas
se resuelven en el gel pero no pueden ser distinguidas por la
diferencia en peso molecular, en el tercer caso podemos encontrar
la combinación en doble cadena WT/MUT, en este caso hay
formación de un loop en la región de delecion de
las 3 bases debido al no apareamiento de las tres bases
existentes en la cadena WT, este loop produce un cambio
conformacional el cual produce una corrida diferencial en el gel
de polyacrilamida, de esta forma podemos detectar la presencia
del alelo mutado por la aparición de dos bandas, y a
partir de una muestra de sangre, puede ser
detectado el HPNCC antes del desarrollo de la
enfermedad.
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