Producción in vitro de embriones bovinos: suplementación de los medios de cultivo con suero
Publicación original: |
- Sistema de
producción in vitro de
embriones - Cultivo
embrionario - I.
fuente de energía - II. Fuente de
proteína - Bibliografía
SUMMARY: Techniques for producing
bovine preimplantation embryos by in vitro maturation
and fertilization, offers the potential for a large number of
embryos at low cost to be used for basic scientific research
(embryo development, transgenesis, cloning) or for commercial
purposes. Embryo culture conditions can influence in
vitro embryo development significantly, provoking deviations
responsible for low quality compared with in vivo
counterparts. In particular, serum supplementation alters both
embryo morphology and quality and eliminating serum from the
media could be beneficial to produce good quality embryos for
cryopreservation and embryo transfer. The objectives of this
review are to describe the general aspects of in vitro
embryo culture and summerize some hypotheses about the way serum
could alter embryo development and quality.
Key words: in vitro production, serum,
embryo quality.
RESUMEN: Las técnicas
para producir embriones bovinos, en estadios de
preimplantación mediante la maduración de ovocitos
y su posterior fertilización in vitro, ofrece la
posibilidad de obtener embriones a bajo costo para ser
utilizados con fines de estudio (desarrollo
embrionario temprano, transgénesis, clonación) o con propósitos
comerciales. Las condiciones de cultivo in vitro pueden
influenciar significativamente el desarrollo
embrionario, determinando cambios responsables de su menor
calidad,
comparados con los embriones producidos in vivo . En
particular, la adición de suero a los medios de
cultivo altera tanto la morfología
embrionaria como su calidad, y su eliminación
posibilitaría producir embriones de buena calidad para ser
criopreservados y transferidos. Los objetivos de
esta revisión son describir los aspectos generales del
cultivo in vitro de embriones y resumir algunas hipótesis referidas a los mecanismos por
los cuales el suero podría alterar el desarrollo y la
calidad embrionaria.
Palabras clave: producción in vitro, suero,
calidad embrionaria.
INTRODUCCIÓN
Durante muchos años se ha trabajado buscando
reproducir artificialmente los eventos de la
maduración y fertilización ovocitaria, y el
desarrollo embrionario temprano. Así, lo que en principio
sólo tenía fines de investigación, en los últimos
años se ha comenzado a utilizar con propósitos
comerciales.
Los resultados de producción in vitro de
embriones en distintas especies fueron mejorando
significativamente a medida que avanzaron los conocimientos
acerca de sus requerimientos. Para ello, fue necesario
transformar los medios de cultivo primitivos, muy complejos y
suplementados frecuentemente con suero, en medios más
definidos, en los cuales cada uno de sus componentes pudiera ser
estudiado en función
del efecto que genera sobre el desarrollo embrionario, su
sobrevida poscriopreservación, la tasa de gestación
y el porcentaje de crías viables.
SISTEMA DE PRODUCCION IN
VITRO DE EMBRIONES.
El proceso de
producción in vitro de embriones bovinos puede
dividirse en tres pasos fundamentales, los cuales,
independientemente del protocolo
utilizado, en orden cronológico son: Maduración de
ovocitos, Fecundación de ovocitos maduros, Cultivo de
embriones.
Estos tres pasos, comprenden una compleja serie de
procesos
fisiológicos, muchos de los cuales son aún
desconocidos, condicionando cada uno per se el éxito o
el fracaso del siguiente. Luego de la maduración in
vitro, aproximadamente el 90% de los ovocitos inmaduros
puestos a cultivar, alcanzan la metafase II y expulsan el primer
cuerpo polar entre las 16 y 24 hs de comenzada la
maduración. De estos, aproximadamente el 80% es fecundado
y comienzan a dividirse, al menos, hasta el estadio de 2 a 4
células. Sin embargo, sólo un 25-40%
alcanza el estadio de blastocisto (B) o blastocisto expandido
(Bex) luego del cultivo durante 6-7 días. Esto indica que
el cultivo embrionario, correspondiente al paso más
prolongado dentro del proceso de producción in
vitro, es el período en el que se establece el mayor
porcentajes de pérdidas del sistema. A su
vez, durante esta etapa, se define en gran medida la calidad de
los embriones obtenidos (Enrigh y col 2000, Rizos y col 2002,
Galli y col 2003, Lonergan y col 2003, Lonergan y col
2004).
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