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Caracterización y diferenciación de células madre



    1. El mundo de las células
      madre
    2. Conceptos
      básicos
    3. Fuentes para la
      obtención de células madre
    4. Clasificación de las
      células madre
    5. Células madre
      adultas
    6. Investigar con células
      madre adultas
    7. Comparando a las
      células madre embrionarias con las de los
      adultos
    8. Importancia
      comercial
    9. Terapias
    10. Los científicos y la
      investigación de las células
      madre
    11. Bibliografía

    Introducción:

    La mayoría de las células de un individuo
    adulto (nos estamos refiriendo al hombre y los
    mamíferos superiores) no suelen
    multiplicarse, salvo para mantenimiento
    de algunos tejidos como la
    sangre y la
    piel. Las
    células del músculo y de la grasa en condiciones
    normales no se dividen. Si engordamos, no es que tengamos
    más células, en realidad tenemos la misma cantidad
    de células, pero éstas han aumentado de
    tamaño.

    Si una lagartija pierde la cola, le vuelve a crecer. En
    los mamíferos no ocurre así. Si un individuo pierde
    un miembro, no lo vuelve a desarrollar. Su capacidad de
    regeneración está limitada a la
    cicatrización. Sin embargo, en prácticamente todos
    los tejidos hay unas células que, aunque habitualmente no
    se dividen, en condiciones particulares pueden proliferar y
    regenerar ese tejido. Artificialmente se ha visto que estas
    células tienen capacidad de reproducirse y generar otros
    tejidos distintos, y reciben el nombre de células
    madre.

    Palabras clave: células madre, cigoto,
    pluripotencia, embrionarias.

    El mundo de las
    células madre

    Sabemos que nuestro cuerpo
    está hecho de células de diferentes tipos (por
    ejemplo, células de la sangre, células de la piel,
    células cervicales). Sin embargo, a menudo nos olvidamos
    de que todos estos tipos diferentes de células surgieron
    de una sola célula, el
    huevo fertilizado.

    Los biólogos del desarrollo
    estudian los extraordinarios eventos que
    ocurren entre el momento de la fertilización del huevo y
    la formación de un nuevo individuo.

    • Los primeros pasos simplemente involucran a la
      división celular: una célula se convierte en dos
      células; dos células en cuatro células,
      etc.
    • Cada una de estas células individuales en el
      desarrollo temprano no está especializada (sin
      diferenciar), es decir, no posee aún una función
      específica en el cuerpo, aunque tiene la capacidad de
      contribuir a todos los órganos de un individuo, es
      decir, se conoce como totí potente.
    • Estas células se llaman células madre
      embrionarias (ES en sus siglas en inglés) y tienen tanto la capacidad de
      auto renovarse, manteniendo así un suministro continuo
      de células madre, como también la habilidad de
      dar origen a células especializadas (diferenciadas),
      tales como células del hígado o del cerebro.
    • Se cree que una vez que se diferencian, las
      células permanecen en este nuevo estado,
      generalmente perdiendo su habilidad para dividirse.

    Las células madre también existen en los
    adultos y permiten que ciertos tejidos se regeneren durante la
    vida. Ellas también tienen la habilidad de auto renovarse
    y de poder
    diferenciarse en linajes múltiples. De hecho, la lista que
    identifica las células madre en adultos y las
    líneas específicas de células progenitoras
    (con habilidades limitadas de auto renovación) está
    creciendo.

    Conceptos
    básicos:

    Definición de células
    madre
    : son aquellas
    células dotadas simultáneamente de la capacidad de
    autor renovación (es decir, producir más
    células madre) y de originar células hijas
    comprometidas en determinadas rutas de desarrollo, que se
    convertirán finalmente por diferenciación en tipos
    celulares especializados.

    En el contexto de la actual investigación, se pretende obtener
    células madre que se mantengan como tales en cultivo en el
    laboratorio, y
    que bajo determinados estímulos puedan conducir a
    poblaciones de células diferenciadas.

    El zigoto (óvulo fertilizado) es una
    célula totí potente, capaz de dar origen a
    todo el organismo. Durante las primeras divisiones el
    embrión es una esfera compacta (mórula), en
    la que todas las células son totí potentes, y de
    hecho esto se refleja de modo natural en los gemelos
    monozigóticos. A los pocos días comienza una
    primera especialización, de modo que se produce un
    blastocisto, con una capa superficial que dará
    origen al trofoblasto, del que deriva la placenta,
    y una cavidad casi "hueca" (rellena de fluido) en la que
    está la masa celular interna (m.c.i.).

    Las células de esta m.c.i. son
    pluritotentes, porque aunque por sí solas no pueden
    dar origen al feto completo
    (necesitan el trofoblasto), son el origen de todos los tejidos y
    tipos celulares del adulto.

    Hay que aclarar un punto: aunque las células de
    la masa celular interna del blastocisto son pluripotentes, no son
    en sí mismas células madre dentro del
    embrión, porque no se mantienen indefinidamente como tales
    in vivo, sino que se diferencian sucesivamente en los
    diversos tipos celulares durante la fase intrauterina.

    Lo que ocurre es que cuando se extraen del
    embrión y se cultivan in vitro bajo ciertas
    condiciones, se convierten en células "inmortales" dotadas
    de esas dos propiedades de las que hablábamos: autor
    renovación y pluripotencia.

    Pluripotencia: Las
    células madre pueden diferenciarse in vivo e in
    vitro
    en una gran diversidad de tipos celulares.

    In vivo dicha multipotencia se manifiesta cuando
    al incorporar células madre en blastocistos pueden dar
    origen a cualquier tejido u órgano,

    In vitro pueden contribuir igualmente, con las
    señales
    adecuadas, a diferentes líneas celulares de las tres capas
    embrionarias (ecto-, meso- y endodermo). Este es el campo donde
    más se está investigando actualmente, por su
    relevancia para la
    clonación terapéutica.

    Las fuentes para
    la obtención de células madre
    El uso clínico principal de las células madre es
    como una fuente de células donantes, las cuales son usadas
    en el reemplazo de células durante las terapias de
    trasplante. Las células madre pueden ser obtenidas de
    varias fuentes:

    • Embriones de repuesto: las células madre pueden
      provenir de embriones extra que han sido almacenados en
      clínicas de fertilidad y que no fueron utilizados por
      las parejas donantes para la concepción de niños.
    • Embriones de propósito especial: estos son embriones
      creados por medio de fertilización in vitro
      (artificialmente en el laboratorio) para el propósito
      específico de obtener células madre.
    • Embriones clonados: estos son embriones clonados en
      laboratorios por medio del método
      de transferencia somática nuclear, con el fin de
      cosechar sus células madre.
    • Fetos abortados: los fetos de desarrollo temprano que han
      sido abortados contienen células madre, las cuales
      pueden ser cosechadas.
    • Cordones umbilicales: este tejido post-parto posee
      potencial para la investigación.
    • Tejidos u órganos adultos: se pueden obtener
      células madre de tejidos u órganos provenientes
      de adultos vivos durante la cirugía.
    • Cadáveres: el aislamiento y supervivencia de
      células progenitoras neurales de tejidos post-mortem
      (hasta 20 horas después de la muerte)
      ha sido reportado y provee una fuente adicional de
      células madre humanas.1

    Las células madre embriónicas deben ser
    obtenidas cuando el embrión se encuentra en un estado
    temprano de su desarrollo, es decir, cuando el huevo fertilizado
    se ha dividido hasta formar aproximadamente 1.000 células.
    Estas células se separan y se mantienen en un envase de
    cultivo celular, deteniendo así el desarrollo
    embriónico que conlleva a la creación de un
    individuo. Es por esto que la investigación en
    células madre embriónicas es el tópico de
    debates éticos. El uso de células madre de adultos
    posa menos dilemas éticos. Sin embargo, las células
    madre de adultos pueden no tener el mismo potencial para usos
    médicos terapéuticos que tienen aquellas derivadas de los
    embriones.

    Clasificación de
    las células madre:

    En los animales
    superiores, las células madre se han clasificado en dos
    grupos. Por un
    lado, las células madre embrionarias (Embrionic stem o
    EScells)
    . Estas células derivan de la Masa celular
    interna del embrión en estadio de blastocisto (7-14
    días), y son capaces de generar TODOS los diferentes tipos
    celulares del cuerpo, por ello se llaman células
    pluripotenciales. De estas células se derivaran, tras
    muchas divisiones celulares, el otro tipo de células, la
    células madre órgano-específicas. Estas
    células son multipotenciales, es decir, son capaces de
    originar las células de un órgano concreto en el
    embrión, y también, en el adulto.
    El ejemplo más claro de células madre
    órgano-específicas, es el de las células de
    la médula ósea, que son capaces de generar todos
    los tipos celulares de la sangre y del sistema inmune.
    Pero estas células madre existen en muchos más
    órganos del cuerpo humano,
    y podemos encontrar en la literatura científica
    como ya se han aislado células madre de adulto de la piel,
    grasa subcutánea, músculo cardíaco y
    esquelético, cerebro, retina, páncreas…

    A día de hoy, se han conseguido cultivar (multiplicar)
    estas células tanto en in-vitro (en el laboratorio), como
    in-vivo (en un modelo animal)
    utilizándolas para la reparación de tejidos
    dañados. A pesar de todo, la aplicación de estas
    técnicas de transferencia de células
    madre de adulto para el recambio y reparación de tejidos
    enfermos está todavía en sus comienzos.
    Hasta ahora ha existido la creencia generalizada de que estas
    células madre órgano específicas,
    están limitadas a generar sólo células
    especializadas y diferenciadas del tejido donde residen, es
    decir, han perdido la capacidad de dar lugar a otras estirpes
    celulares de cuerpo: son células multipotenciales.

    Sin embargo la reciente publicación de múltiples
    estudios ha hecho cambiar esta visión de las
    células madre órgano-específicas, haciendo
    evidente que células madre de adulto procedentes de
    cualquier tejido pueden diferenciarse a células y tejidos
    de otras localizaciones y estirpes distintas.

    Estos experimentos han
    comprobado que células madre de adulto, cultivadas y
    sometidas a ambientes humorales distintos a los habituales,
    pueden reprogramarse (TRANSDIFERENCIARSE), y dar lugar a otros
    tipos celulares que hasta ahora se pensaba que eran incapaces de
    generar. Es decir, ya no serían multipotenciales, si no
    pluripotenciales. Si esto es así, se podría decir
    que no existe una diferencia esencial entre la célula
    madre embrionarias y las de adulto.

    Células madre
    adultas

    En un individuo adulto hay tejidos en los que algunas de sus
    células se dividen activamente, pero en otros no. Entre
    los que se dividen están la médula ósea y la
    piel, en ellos encontramos células madre de la
    médula ósea y de la piel. Estas células se
    reproducen y generan células especializadas de sangre y de
    piel respectivamente. En otros tejidos se han encontrado
    también células madre especializadas, capaces de
    reproducirse y de generar tejidos especializados y sólo
    esos tejidos. Estas células madre especializadas son muy
    escasas y difíciles de aislar.

    En un principio se pensó que las células madre
    especializadas sólo podían general células
    especializadas del mismo tipo. Sin embargo se ha observado que
    estas células pueden llegar a generar células con
    una especialización diferente de la original. Así
    células madre neuronales de la médula espinal han
    producido diferentes tipos de células
    sanguíneas.

    Estudios en ratas han obtenido células hepáticas
    partiendo de células madre de médula espinal. Cada
    día salen a la luz nuevos
    ejemplos de células madre especializadas que producen
    células especializadas diferentes de las esperadas. Esto
    demuestra que las células madre presentes en el individuo
    adulto son mucho más flexibles de lo que se pensaba.

    De aquí se derivan grandes expectativas de terapias
    innovadoras. Parece que las células madre adultas tienen
    un gran potencial y quizá más facilidades que las
    células madre embrionarias puesto que se puede partir de
    células del propio individuo y, por tanto, con la misma
    carga genética.
    Esto solventa, además, los serios problemas
    éticos de manipular y destruir embriones.

    Investigar con
    células madre adultas

    Por otro lado, se podrían obtener células madre
    del propio individuo adulto y especializarlas igualmente para
    obtener otros tejidos o reconstruir los órganos
    necesarios. Un buen suministro de células madre propias
    podría ser el cordón umbilical obtenido en el
    momento del parto y conservado congelado.

    Se recogen células madre de un individuo adulto. Otra
    posibilidad es guardar congelado el cordón umbilical del
    bebé al nacer que puede servir como suministro muy
    válido de células madre.

    Se cultivan las células madre en el medio adecuado
    hasta obtener el tejido que se necesite.

    Se trasplanta al individuo enfermo el tejido cultivado o las
    células necesarias para regenerar el órgano
    enfermo.

    Comparando a las
    células madre embrionarias con las de los
    adultos

    Las células madre embrionarias
    poseen ventajas y desventajas para el uso terapéutico.
    Ventajas: Estas células son:

    • Flexibles: Poseen el potencial de formar cualquier
      célula del cuerpo.
    • Inmortales: Un linaje celular puede potencialmente
      suministrar una cantidad infinita de células con
      características cuidadosamente definidas.
    • Fácilmente obtenibles: los embriones humanos pueden
      ser obtenidos de las clínicas de fertilidad.

    Desventajas: Ellas pueden:

    • Ser difíciles de controlar: El método para
      inducir el tipo de célula para tratar a una enfermedad
      en particular debe ser definido y optimizado.
    • Entrar en conflicto
      con el sistema inmune del paciente: Es posible que las
      células trasplantadas difieran en su perfil inmune de
      las del recipiente y que sean entonces rechazadas.
    • Ser éticamente controversiales: Las personas que
      creen que la vida comienza en el momento de la
      concepción dicen que el llevar a cabo investigaciones
      en embriones humanos no es ético, aún cuando el
      donante dé su consentimiento.

    Las células madre adultas también poseen
    características tanto buenas como difíciles para el
    uso terapéutico:

    Ventajas: Estas células

    • Ya están más o menos especializadas: La
      inducción puede ser más
      sencilla.
    • Son inmunológicamente resistentes: Los recipientes
      que reciben los productos de
      sus propias células madre no experimentan el rechazo
      inmunológico.
    • Son flexibles: Las células madre adultas pueden ser
      usadas para formar otros tipos de tejido.
    • Tienen una disponibilidad variada: Algunas células
      madre adultas son fáciles de cosechar mientras que
      cosechar otras, como por ejemplo, las células madre
      neurales (del cerebro), puede ser peligroso para el
      donante.

    Desventajas: Ellas pueden:

    • Estar disponibles en cantidades mínimas: Es
      difícil obtenerlas en grandes cantidades.
    • Finitas: Ellas no viven tan largo bajo cultivo como las
      células madre embriónicas.
    • Genéticamente inadecuadas: Las células madre
      cosechadas pueden llevar consigo mutaciones que causan enfermedades o que pueden
      dañarse durante la experimentación.

    Importancia
    comercial

    Bancos de cordón
    umbilical: ¿un seguro de vida
    biológico?

    Obtenidas durante el parto, a partir de la sangre del
    cordón umbilical y de la placenta, las células
    madre o stem cells son crió preservadas en tambores con
    hidrógeno líquido a menos 196°,
    y pueden ser descongeladas en cualquier momento para ser
    trasplantadas como forma de tratamiento para diversas
    enfermedades que pueda sufrir en el futuro el bebe o algún
    pariente cercano.

    Hoy en día, el trasplante de células de
    cordón umbilical se emplea en el tratamiento de
    enfermedades oncohematológicas, como la leucemia o los
    linfomas, así como para cualquier cáncer en cuyo
    tratamiento sea necesario reconstruir la médula
    ósea dañada por la quimioterapia.

    Asimismo, estos trasplantes han demostrado ser efectivos
    para el tratamiento de afecciones menos frecuentes, como ciertas
    anemias (la de Fanconi o las betatalasemia, por ejemplo) y
    trastornos metabólicos.

    Todo hace suponer que en un futuro las células
    madre -cuyas principales características son dividirse
    indefinidamente y ser capaces de convertirse en cualquier tipo de
    célula del organismo- darán alivio, cuando no cura,
    a un espectro mucho mayor de enfermedades. Ya hay trabajos de
    investigación que sugieren que las células madre
    servirán de reemplazo para cualquier célula
    dañada, como las del páncreas en la diabetes, las del
    corazón
    en el infarto o las
    neuronas en el Parkinson y el
    Alzheimer
    (Chillik, 2004)

    La posibilidad de contar con células madre
    obtenidas del cordón umbilical (que habitualmente se
    desecha tras el parto) es presentada como una alternativa
    científicamente válida y éticamente
    irreprochable al uso terapéutico de células madre
    embrionarias

    Terapias de
    células madre

    Las células madre ofrecen
    la oportunidad de transplantar una fuente viva para la auto
    regeneración. Los transplantes de médula de los
    huesos (BMT en
    sus siglas en inglés) son una reconocida aplicación
    clínica del transplante de células madre. Los BMT
    pueden repopular a la médula ósea y restaurar a
    todos los tipos de células de la sangre después de
    que un paciente ha recibido altas dosis de quimioterapia y/o
    radioterapia, las cuales usamos como nuestra herramienta
    principal para eliminar las células endógenas
    cancerosas.

    El aislamiento de células madre y células
    progenitoras adicionales se está desarrollando ahora para
    apoyar a muchas otras aplicaciones clínicas. Algunas de
    estas se describen a continuación.
    Reemplazo de la piel

    El conocimiento
    de las células madre ha hecho posible que los
    científicos puedan crecer piel nueva a partir de cabellos
    arrancados de la cabeza del paciente. Las células madre de
    la piel (llamadas queratinocitos) residen en los folículos
    del cabello y pueden ser removidas al arrancar el pelo de
    raíz.3 Estas células pueden ser
    cultivadas para formar un equivalente epidérmico de la
    piel de los pacientes y proveer tejido para un injerto antólogo, eliminando el problema del
    rechazo.

    Actualmente, este método está siendo
    estudiado en pruebas
    clínicas como una alternativa a los injertos
    quirúrgicos usados en los casos de úlceras venosas
    y víctimas con quemaduras.
    Transplante de células cerebrales

    Las células neurales madre eran consideradas,
    hasta hace poco, como estrictamente embriónicas. Numerosos
    descubrimientos han comprobado que esto es incorrecto. La
    identificación y localización de células
    neurales madre, tanto embriónicas como adultas, ha sido un
    foco importante de la investigación reciente.

    Algunos objetivos
    importantes para los transplantes de células neurales
    madre son los pacientes con derrames cerebrales, lesiones al
    cordón espinal, y enfermedades neurodegenerativas, como
    por ejemplo, la Enfermedad de Parkinson.
    Esta enfermedad conlleva la pérdida de células que
    producen el neurotransmisor dopamina. El primer ensayo
    doblemente ciego de transplantes de células fetales para
    tratar a la Enfermedad de Parkinson reportó una
    supervivencia y liberación de dopamina proveniente de las
    células transplantadas y una mejora funcional en los
    síntomas clínicos.4 Sin embargo, algunos
    pacientes desarrollaron efectos secundarios, lo cual sugiere que
    hubo una sobresensitización a la dopamina o demasiada
    dopamina producida.

    A pesar de que estos efectos secundarios no fueron
    anticipados, el éxito
    del experimento a nivel celular es significativo. De nuevo, se
    necesitan más estudios y que los estudios actuales
    continúen. Existen más de 250 pacientes que han
    recibido transplantes de tejidos humanos fetales.
    Varias compañías de biotecnología están desarrollando
    estrategias
    diferentes para las terapias de células madre.

    • Diacrin ha estado desarrollando lo que llaman
      xenotrasplantes, usando células fetales de cerdo. Las
      pruebas clínicas han comenzado en pacientes que han
      sufrido un derrame cerebral. Actualmente, estos pacientes
      requieren recibir algún tratamiento en las primeras 24
      horas después del derrame para poder obtener resultados
      terapéuticos efectivos. Muchos pacientes no reciben
      tratamiento a tiempo
      porque los síntomas no son obvios al principio. La
      terapia de Diacrin puede ser aplicada entre semanas y meses
      después del trauma inicial.
    • La estrategia de
      NeuroNova consiste en el cultivo de células humanas
      adultas provenientes de donantes, diferenciarlas en cultivo
      para que produzcan el tipo de célula deseada (neuronas
      dopaminérgicas) las cuales son perdidas en la Enfermedad
      de Parkinson y luego trasplantarlas directamente al cerebro de
      los pacientes.
    • Neurotech está utilizando células
      endoteliales cerebrales alteradas (modificadas para producir
      Interleucina-2 humana) como una inmunoterapia para el
      tratamiento de gliomas. Los resultados de los experimentos en
      ratas han mostrado que estas células "recogen" a las
      células del tumor, lo cual ha resultado en el inicio de
      un estudio clínico.

    Tratamiento para la diabetes

    La diabetes afecta a 16 millones de personas en los
    Estados Unidos
    y es causada por el metabolismo
    anormal de la insulina. Normalmente, la insulina es producida y
    segregada por estructuras
    celulares del páncreas llamadas isletas de
    Langerhans.

    Recientemente, se han podido generar células que
    expresan la insulina a partir de células madre de
    ratón.5 Además, estas células se
    auto-organizan para formar estructuras, las cuales no solo se
    parecen mucho a las isletas pancreáticas normales, sino
    que también producen insulina.

    Las investigaciones futuras necesitan enfocarse en
    formas de optimizar las condiciones para la producción de insulina, con el fin de
    proveer una terapia basada en células madre para tratar a
    la diabetes que pueda reemplazar la necesidad de inyectarse
    insulina constantemente.

    Direcciones futuras
    La
    generación de nuevas neuronas en el cerebro del adulto es
    limitada. Sin embargo, la autoreparación después de
    la muerte de las
    células de las neuronas ha sido demostrada recientemente
    en ratones, lo cual sugiere que las células madre que
    residen normalmente en el cerebro pueden algún día
    ser estimuladas por inductores, en una manera similar a como
    inducimos nuestro sistema inmune por medio de la
    vacunación.6

    Esto podría evitar la necesidad de usar el
    trasplante de células. Hacen falta investigaciones
    intensas sobre los mecanismos celulares involucrados en estos
    procesos.
    El potencial que las células madre embriónicas
    tienen para proveer otros tipos de células diferenciadas
    también necesita ser investigado. La producción de
    células de músculo cardíaco, las cuales han
    demostrado ser evasivas hasta ahora, sería tremendamente
    beneficioso para tratar a las enfermedades cardíacas, las
    cuales constituyen la enfermedad mortal más común
    en los Estados Unidos.

    Los científicos y la
    investigación en células madre

    Los
    científicos creen que la investigación en
    células madre puede llevar a descubrir curas para una gran
    cantidad de enfermedades que nos afligen. Los grupos en contra
    del aborto, algunos
    grupos religiosos y ciudadanos conservadores dicen que el uso de
    células provenientes de embriones es inmoral porque
    destruye a la vida.

    Sin embargo, una encuesta
    reciente de la ABCNews/Beliefnet demostró que los
    norteamericanos apoyan a la investigación en
    células madre en un margen de 2 a 1, diciendo que estas
    investigaciones deben ser financiadas por el gobierno federal,
    a pesar de la controversia en el uso de los embriones
    humanos.7
    La mayor parte de los científicos No apoyan la
    aplicación de estas tecnologías a la clonación de humanos (es decir, no quieren
    que los embriones alterados durante las investigaciones en
    células madre se desarrollen más allá de un
    estado definido).

    Ellos están de acuerdo con los gobiernos y con
    los ciudadanos preocupados y apoyan la prohibición mundial
    de este uso. Sin embargo, ellos quieren tener la
    oportunidad de continuar investigando a las células madre
    para aplicaciones clínicas, bajo regulaciones y
    legislación apropiadas, con la esperanza de poder aliviar
    al sufrimiento humano.

    BIBLIOGRAFÍA:

    www.embrios.org

    www.ugr.es/eianez/biotecnologia

    www.biotech.bioetica.org


    http://www.diariomedico.com/grandeshist/numero2000/reportaje3.html


    http://www.elmundosalud.com/elmundosalud/noticia.html?


    http://stemcells.nih.gov/info/basics/basics1.asp

    Trabajo presentado por:

    Miguel Ángel Ríos N.

    24/05/06

    Enviado por:

    Carlos Gustavo Pea Sanchez

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