La preparación de sangre fresca debe ser
suficientemente delgada para que no queden los
parásitos enmascarados por las células
sanguíneas. Se coloca una gota en un porta (pudiendo
diluirse con suero salino) y se tapa con cubre para evitar la
coagulación. El análisis de sangre fresca es
práctico para la detección de trypanosomas y
microfilarias, por su característica forma de moverse.
Los trypanosomas se ven con un objetivo potente y poca
iluminación. Las microfilarias se detectan con bajos
aumentos. El movimiento en vivo de los parásitos atrae
la atención del observador facilitando el trabajo.
Pero para su determinación específica es
necesario realizar una posterior tinción
permanente.
Para el estudio de parásitos de la Malaria,
Trypanosomas, Filarias y otros, se deben de hacer frotis,
tanto finos como gruesos.
Frotis: Es una capa de células
sanguíneas regularmente distribuidas. Los frotis
delgados producen poca distorsión en la estructura
morfológica de los parásitos. Se usan para
detectar la malaria, tripanosomas y microfilarias. Si la
película de sangre es demasiado gruesa no se ve la
estructura del parásito.
Los frotis gruesos, aunque producen la
distorsión de los parásitos, permiten analizar
mayor cantidad de sangre y aumentan la probabilidad de
detectarlos, haciendo el análisis tres veces
más rápido. Sin embargo, si se hacen mal
resultan inútiles.
PROCEDIMIENTO
Es preferible emplear sangre periférica
(lóbulo de la oreja, yema del dedo) eliminando
previamente con alcohol la grasa de la piel. La
incisión debe ser limpia y profunda, sin que se
precise apretar la herida para que sangre. La
extensión debe de ser rápida para evitar la
coagulación. Es preferible la sangre arterial pues la
venosa distorsiona los resultados.
Frotis delgado:
1. No olvides de usar guantes quirúrgicos
como medida de bioseguridad.
2. Haz la incisión en la yema del dedo, tal
como se te recomienda al inicio
3. Coloca una gota de sangre a 2 cms del extremo de
la lámina portaobjetos
4. con el borde de otro porta contacta con la gota
de sangre y deja que se extienda la sangre por la
línea de contacto.
5. Desplaza el segundo porta sobre el primero con
una inclinación de 30º haciendo una
extensión uniforme y fina. Deja secar al aire y
tiñe.
Frotis grueso:
1. Sigue los pasos 1, 2 y 3 del proceso
anterior
2. Con la esquina de otro porta se extiende la
sangre con movimiento circular y un diámetro de 15
mm.
3. Deja secar y tiñe con Giemsa
1:50
Observación de láminas
coloreadas
1. Ahora, observa lo que te muestra el profesor en
los microscopios, si no puedes verlo nítidamente acude
sólo al tornillo micrométrico y gradúa
el espécimen
2. Observa el trofozoito de T. cruzi, e
identifica la forma, núcleo, flagelo y membrana
ondulante. Ahora, observa los nidos de
amastigotas.
3. Haz la misma observación con los
amastigotas y promastigotas de Leishmania.
4. Ahora, observa las formas de Plasmodium
vivax.
Observación de Trichomonas
vaginalis:
1. Haz un preparado en fresco con el hisopo
conteniendo la secreción vaginal y cúbrelo con
una laminilla
2. Observa a 10X y luego a 40X, busca formas
móviles del protozoario.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué diferencias observas entre las
diferentes fases evolutivas de Trypanosoma?
__________________________________________________________________________________________________________________________
2. ¿Qué es lo que hace el Plasmodium
en el interior del organismo humano?
_______________________________________________________________
3. Se dice que Leishmania es causante de la
úlcera cutánea ¿Qué enfermedades
producen L. donovani y L.
tropica?
_________________________________________________________________________________________
4. ¿Por qué T. vaginalis
causa síntomas sólo en las mujeres?
________________________________________________________________________________________________________________
5. Menciona los diferentes vectores que transmiten a
los parásitos hemáticos y tisulares
______________________________________________________________________________________________________________
OBSERVACIONES
Representa gráficamente lo que has observado
durante el desarrollo de la práctica.
CONCLUSIONES:
___________________________________________________________
Práctica Nº 14
Nombre del Alumno:_________________________________
Grupo______
Profesor de Laboratorio____________________________
Calif:________
PRÁCTICA
Nº 15
Estudio
parasitológico: los trematodos
OBJETIVO
Que el alumno conozca la morfología de los
tremátodos y sus formas evolutivas.
Que sepa diferenciar los diferentes estadios de
estos parásitos
MATERIALES
Muestras de hígado con
fascioliosisLáminas portaobjetos
Láminas cubreobjetos
Bisturí
Láminas con preparados permanentes de:
Fasciola hepatica, Paragonimus sp, Schistosoma
mansoni, Echinostoma. Fases evolutivas de huevo,
miracidio, redia, cercaria y metacerciaMicroscopio
Estereoscopio
INTRODUCCIÓN
Los trematodos o duelas, son una
clase de platelmintos parásitos internos y externos,
tanto de vertebrados como invertebrados. Poseen ganchos o
ventosas en su parte ventral para sujetarse a las
víctimas; su adaptación parásita se ha
traducido en una ausencia de órganos sensoriales,
tales como los ojos. Aunque son hermafroditas y se da la
autofecundación, algunos como los Schistosomas
presentan macho y hembra. En los trematodos del orden
digenéticos, durante sus diferentes estados
larvarios ocupan otros tantos hospederos diferentes
(generalmente invertebrados), para después vivir en un
hospedero definitivo durante su etapa adulta (generalmente
vertebrados). Las duelas suelen vivir en el intestino y otras
cavidades del cuerpo de otros animales (también en la
sangre). Se defienden de la acción de los jugos
digestivos de sus hospederos, mediante una cutícula
muy resistente que reviste su superficie corporal.
Peligros en el laboratorio
Pueden encontrarse estadios infectivos de
Schistosoma spp, (cercarla) y Fasciola spp.
(metacercaria) en el agua o enquistados en plantas
acuáticas en acuarios que se utilizan en los
laboratorios para mantener caracoles marinos, como hospederos
intermedios. La penetración de cercaria de Schistosoma
por la piel y la ingestión accidental de metacercaria
son los peligros primarios. La disección o el
aplastamiento de caracoles infectados con Schistosoma puede
provocar la exposición de la piel o membranas mucosas
a gotas conteniendo cercarias; además, la metacercaria
puede ser transferida inadvertidamente de las manos a la boca
por los dedos o guantes tras el contacto con la
vegetación acuática contaminada o superficies
de acuarios.
Las tres formas más evidentes de combatir la
esquistosomiasis son: practicas higiénicas adecuadas,
tratamiento de los huéspedes infectados y
eliminación de los caracoles. Existe tratamiento
seguro y efectivo para la mayoría de las infecciones
provocadas por trematodos.
Los trematodos tienen un ciclo biológico con
diferentes fases que se representan en la figura
1.
Figura 1.
Ciclo biológico de los
Trematodos
PROCEDIMIENTO
Siempre debes utilizar guantes
1. Con el bisturí, haz cortes del
hígado y con una pinza quita un espécimen
adulto de Fasciola, observa su forma, color,
tamaño
2. Luego, con el mismo bisturí secciona a la
Fasciola aproximadamente a nivel de la ventosa
ventral.
3. Con un mondadientes raspa la zona seccionada
sobre una gota de lugol contenido en una lámina
portaobjetos
4. Cúbrelo con una laminilla y examina al
microscopio a 10X, verás gran cantidad de huevos del
parásito, observa su tamaño y color.
Observación de láminas
coloreadas
1. Ahora, observa lo que te muestra el profesor en
los microscopios, si no puedes verlo nítidamente acude
sólo al tornillo micrométrico y gradúa
el espécimen
2. Observa los adultos coloreados de Fasciola,
Paragonimus, Schistosoma y Echinostoma, haz diferencia entre
las estructuras internas de estos adultos.
3. Realiza la misma observación con las
formas evolutivas: miracidio, redia, cercaria y
metacercaria.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué diferencias observas entre las
diferentes fases evolutivas de Fasciola?
________________________________________________________________
2. Menciona en qué lugares del cuerpo humano
se ubican los adultos de los tremátodos
estudiados
_______________________________________________________________
3. Los huevos que has separado de los adultos de
Fasciola ¿son infecciosos para el hombre?
Explica
__________________________________________________________________________________
4. ¿De qué manera causa
infección Schistosoma mansoni en el
hombre?
____________________________________________________________________________________
5. ¿Qué medidas preventivas das para
evitar la infección con tremátodos?
______________________________________________________________________________________________________________
OBSERVACIONES
Representa gráficamente lo que has observado
durante el desarrollo de la práctica.
CONCLUSIONES:
________________________________________________________
Práctica Nº 15
Nombre del Alumno:_________________________________
Grupo______
Profesor de Laboratorio____________________________
Calif:________
PRÁCTICA
Nº 16
Estudio
parasitológico: los cestodos
OBJETIVO
Que el alumno conozca la morfología de los
cestodos y sus formas larvarias.
MATERIALES
Muestras de hígado con
hidatidosisMuestras conservadas de adultos de
teniasMateria fecal
Láminas portaobjetos
Láminas cubreobjetos
Bisturí
Láminas con preparados permanentes de
estructuras de: T. saginata, T. solium,
Hymenolepis, Echinococcus, Dypilidium,
Diphyllobothrium.Microscopio
Estereoscopio
INTRODUCCIÓN
Los cestodos o tenias son platelmintos hermafroditas
con el cuerpo segmentado y desprovisto de tubo digestivo, ya
que se alimentan directamente por ósmosis de los
nutrientes existentes en el intestino del hospedero. El
cuerpo de las tenias adultas, llamado estróbilo,
aplanado dorsoventralmente, está formado por una serie
de segmentos, anillos o proglótides (de 3 a 4.000),
tanto más grandes y maduros cuanto más disten
del escólex o cabeza, provisto de una serie de
ventosas o ganchos mediante los que se adhieren. En
función del número de anillos se diferencia en
inmaduros y maduros o grávidos. Las tenias, hasta
llegar al estado adulto, pueden pasar por diversas fases en
un solo hospedero (Hymenolepis nana) o, lo que es
más frecuente, en diversos hospederos intermediarios,
que son específicos para cada cestodo. Estas fases
son:
Huevo o embrióforo.
Oncósfera o embrión
hexacanto.Larva que según la especie puede ser:
Cisticerco, Cisticercoide, Cenuro, Hidátide,
Procercoide, Plerocercoide.Adulto.
El hombre puede ser parasitado por cestodos adultos
y en este caso, es el hospedero definitivo, fijándose
a la pared intestinal. El hombre también puede ser
parasitado por formas en estado larvario y en este caso es
hospedero intermediario, y las larvas pueden tener diversas
localizaciones: hígado, pulmón,
músculos, ojos, etc.
Las tenias presentan distintos tipos de ciclos
biológicos que se representan en las figuras 1, 2 y
3.
Las infecciones producidas por cestodos son debidas
a Echinococcus granulosus, Taenia solium e
Hymenolepsis nana. La vía de
penetración en el organismo es por ingestión de
huevos infectivos de E. granulosus o T.
solium. H. nana es un parásito
cosmopolita que no requiere de un hospedero intermediario y
que se transmite directamente por ingestión o bien a
través de heces infectadas de humanos o
roedores.
Figura 1
Ciclo biológico de
Taenia saginata
Figura 2
Ciclo biológico de
Taenia solium
Figura 3
Ciclo biológico de
Hymenolepis nana en las heces de humanos, que son el
hospedero definitivo de estos
parásitos.
Precauciones recomendadas
Se recomienda el uso de guantes para las operaciones
que puedan implicar el contacto con heces o con superficies
contaminadas con heces frescas procedentes de perros
infectados con E. granulosus, de heces procedentes
de humanos infectadas con T. solium y heces de
humanos o roedores infectados con Hymenolepsis
nana.
PROCEDIMIENTO
Siempre debes utilizar guantes
1. Prepara láminas portaobjetos con muestras
de heces como ya sabes hacerlo
2. Observa al microscopio a 10X y 40X buscando
huevos de cestodos, grafícalos.
Observación de láminas
coloreadas
1. Ahora, observa lo que te muestra el profesor en
los microscopios, si no puedes verlo nítidamente acude
sólo al tornillo micrométrico y gradúa
el espécimen
2. Observa las diferentes formas de escólex
de las tenias estudiadas, grafícalos.
3. Realiza la misma observación con los
proglótidos grávidos de las tenias mostradas,
grafícalos.
4. Observa el espécimen adulto de
Echinococcus, grafícalo
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las formas larvarias de
los cestodos estudiados? Y ¿Cuáles pueden estar
como tales en el hombre?
__________________________________________________________________________________________________________________________
2. ¿Por qué es difícil eliminar
los adultos de las tenias del tracto intestinal?
_______________________________________________________________________________________________________________________
3. ¿Qué es la neurocisticercosis
humana?
__________________________________________________________________________________________________________________
4. ¿De qué manera causa
infección Diphyllobothrium en el hombre?
________________________________________________________________________________________________________________
5. ¿Qué medidas preventivas das para
evitar la infección con céstodos?
______________________________________________________________________________________________________________
OBSERVACIONES
Representa gráficamente lo que has observado
durante el desarrollo de la práctica.
CONCLUSIONES:
_______________________________________________________________________________________
Práctica Nº 16
Nombre del Alumno:_________________________________
Grupo______
Profesor de Laboratorio____________________________
Calif:________
PRÁCTICA
Nº 17
Estudio
parasitológico: los nematodos
OBJETIVO
Que el alumno esté en condiciones de conocer
y diferenciar la morfología de los
nematodos.
MATERIALES
Materia fecal
Láminas portaobjetos
Láminas cubreobjetos
Especimenes adultos de Ascaris y Toxocara
conservadosLáminas con preparados permanentes de
adultos de: Trichuris, Enterobius, Uncinarias.Microscopio
Estereoscopio
INTRODUCCIÓN
Los nematodos (de nemas, hilo, y oedes, similar,
parecido) son gusanos filiformes, con un extremo anterior
provisto de papilas, ganchos, placas o dientes (para fijarse
en los tejidos o abrirse paso en ellos), y otro posterior, de
morfología variable. Algunas especies de nematodos son
vivíparas (triquina) u ovivíparas
(Strongyloides), pero la mayoría son
ovíparas.
Los nematodos tienen diferentes tipos de ciclos
vitales. La mayoría de ellos tienen un hospedero
definitivo, y se produce la transmisión a otro por
ingestión de huevos o de larvas, penetración de
éstas a través de la piel o las mucosas, o bien
a través de un hospedero intermediario
(artrópodo), en el que sufre un ciclo más o
menos complicado. Los huevos eliminados por las heces, orina,
esputo y piel se convierten en larvas, que presentan diversas
mudas o fases hasta invadir al nuevo hospedero. En algunas
especies, el huevo es la única forma
infectante.
Se han descrito casos de infecciones asociadas al
laboratorio con Ascaris, Strongyloides y Enterobius. Para
aquellas personas que están sensibilizadas pueden
representar un riesgo las reacciones alérgicas a
diferentes componentes antagónicos de los nematodos,
como por ejemplo antígenos en forma de aerosol de
Ascaris. No se conocen infecciones asociadas con animales de
laboratorio, incluidos los artrópodos, pero las larvas
infectivas de Strongyloides contenidas en las heces de
primates no homínidos, representan un peligro
potencial de infección para los cuidadores de animales
y personal de laboratorio.
Los huevos y larvas en las heces frescas de
hospederos infectados, en general, no son infecciosos. El
desarrollo a etapas infecciosas puede transcurrir en
períodos de un día a varias semanas. La
ingestión de huevos infectados o la penetración
a través de la piel de larvas infectivas representan
el principal peligro.
Los artrópodos infectados con filarias
representan un peligro potencial para el personal de
laboratorio. En este colectivo, con exposiciones repetidas a
antígenos de Ascaris en forma de aerosol, es frecuente
desarrollar hipersensibilidad.
PROCEDIMIENTO
Siempre debes utilizar guantes
1. Prepara láminas portaobjetos con muestras
de heces como ya sabes hacerlo
2. Observa al microscopio a 10X y 40X buscando
huevos de nematodos, grafícalos.
Observación de láminas
coloreadas
1. Ahora, observa lo que te muestra el profesor en
los microscopios, si no puedes verlo nítidamente acude
sólo al tornillo micrométrico y gradúa
el espécimen
2. Observa los adultos de los diferentes nematodos,
grafícalos.
3. Observa el espécimen adulto de Ascaris y
Toxocara, grafícalos
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué se dice que los nematodos
son geohelmintos?
__________________________________________________________________________________________________________________________
2. ¿Qué acciones patológicas
puede causar Ascaris en el organismo humano?
_______________________________________________________________________________________________________________________
3. ¿Qué es la anquilostomiasis y
cómo se adquiere?
__________________________________________________________________________________________________________________
4. ¿Qué parásito causa la
elefantiasis y de qué forma el hombre adquiere la
infección?
________________________________________________________________________________________________________________
5. ¿Qué medidas preventivas das para
evitar la infección con nematodos?
______________________________________________________________________________________________________________
OBSERVACIONES
Representa gráficamente lo que has observado
durante el desarrollo de la práctica.
CONCLUSIONES:
____________________________________________________________
Práctica Nº 17
Nombre del Alumno:_________________________________
Grupo______
Profesor de Laboratorio____________________________
Calif:________
Bibliografía
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Clínica. 4ª Edición. Editorial El
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19982. Cortés, J. Manual de
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Cualquiera de estas prácticas se puede hacer
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http://www.joseacortes.com/practicas/3. Cortés El Microscopio
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óptico compuesto. Mantener seca y limpia la
platina del microscopio. Si se derrama
sobre ella
www.joseacortes.com/practicas/microscopio.htm4. Gaitán, MA, Manual de
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Infecciosas, principios y práctica " 4º
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http://escuela.med.puc.cl/paginas/udas/Parasitologia/Parasitol_03.html16. Zinsser, Microbiología,
Editorial Médica Panamericana, 18º
edición, México. 1990
Autor:
Miguel Salvador
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