Soroprevalência de Babesia bovis em bovinos na mesorregião Norte Fluminense (página 2)

O estudo foi conduzido com amostras de soro de bovinos de nove municípios da mesorregião Norte Fluminense do estado do Rio de Janeiro, segundo divisão político-administrativa da Fundação CIDE. A população estimada de bovinos desta mesorregião é de 518.465 cabeças, em uma área total de 663.198 hectares com a produção de leite de 81.806.000 litros anuais (CIDE 1997).

As amostras de soros foram colhidas aleatoriamente de bovinos jovens e adultos, maiores que um ano de idade, aparentemente sadios, puros Bos indicus ou mestiço B. indicus x B. taurus. O tamanho da amostra foi determinado, por conveniência e facilidade de acesso à propriedade, tomando como parâmetro a coleta de no mímino um número maior ou igual a 0,1% da população total de bovinos da mesorregião. Coletou-se, assepticamente, o sangue de 532 animais por venopunção jugular e, os soros obtidos foram aliquotados em tubos tipo Eppendorf e armazenados à –20°C até o momento da análise sorológica.

As 532 amostras de soro coletadas estão distribuídas entre nove municípios com a seguinte amostragem: Campos (n= 186), Macaé (n= 91), São Fidélis (n= 55), Carapebus (n= 10), Quissamã (n= 50), Conceição de Macabú (n= 27), São Francisco de Itabapoana (n= 69), Cardoso Moreira (n= 25) e São João da Barra (n= 19). Os animais estudados foram divididos por grupos; quanto à faixa etária: 1 a 3 anos (n= 110), 3 a 6 anos (n= 241) e > 6 anos (n= 181); quanto ao sexo: fêmeas (n= 497) e machos (n= 35) e quanto à aptidão zootécnica: animais com aptidão zootécnica para corte (n= 444) e animais com aptidão zootécnica para leite (n= 88).

Realizou-se o ensaio ELISA indireto para detecção de anticorpos da classe IgG anti Babesia bovis, utilizando-se microplacas de 96 orifícios para titulação. As microplacas foram sensibilizadas com extrato total antigênico de B. bovis, isolado do Mato Grosso do Sul em bezerros com parasitemia de 23,00% (Kessler et al. 1987), segundo técnica descrita por Araújo et al. (1998), diluído em tampão carbonato pH 9,6. Os soros controles negativo e positivo, bem como os soros testes foram diluídos à 1:500 em tampão salino fosfatado com Tween 20 a 0,05% (PBST) pH 7,4. Adicionou-se às placas conjugado IgG de coelho anti IgG bovina marcada com fosfatase alcalina (Sigma Chemical) diluído em PBST pH 7,4. Utilizou-se como substrato-cromógeno para-nitrofenil fosfato (Sigma Chemical) diluído em tampão glicina pH 10,5. A leitura do ensaio foi realizada em espectrofotômetro multicanal para microplacas de 96 orifícios (Bio Rad Laboratories, model 550 Microplate Reader) ao comprimento de onda de 405hm.

A análise soroepidemiológica das 532 amostras de soros revelou 484 (90,98%) animais reagentes positivos ao ELISA indireto, com anticorpos da classe IgG anti Babesia bovis, dos quais: 20,30% com título de 1:500, 35,72% com título de 1:1000, 20,87% com título de 1:2000, 7,33% com título de 1:4000, 2,82% com título de 1:8000, 2,63% com título de 1:16000, 0,56% com título de 1:32000, 0,75% com título de 1:64000 e 9,02% foram negativos (Quadro 1).

A região estudada foi considerada como uma área de estabilidade enzoótica. Pois, a soroprevalência encontrada está acima do limite (75,0%) para se considerar uma área como estável enzooticamente (Mahoney 1975). Este resultado é esperado, pois na maioria das áreas compreendidas entre os paralelos 32° latitude sul e 40° latitude norte os vetores de Babesia bovis, carrapatos do gênero Boophilus, estão amplamente difundidos (Mahoney & Ross 1972, Kuttler 1988, Leite et al. 1989). A diferença significativa observada entre os animais jovens, quando comparada aos animais adultos pode ser justificada pois, a taxa de inoculação de B. bovis pelo B. microplus é naturalmente baixa (Mahoney 1967).

Embora na mesorregião estudada o perfil da pecuária bovina é predominantemente de corte, constituída na sua maioria por raças de origem indiana (Bos indicus) e seus mestiços (CIDE 1997), naturalmente resistentes a B. microplus (Mahoney 1975, Madruga et al. 1984a,b) e; embora existam fatores de resistência natural à babesiose (Levy et al. 1982), o percentual de animais com anticorpos anti B. bovis nesta região diminue com a idade. E, o fato dos bovinos com idade entre 1 a 3 anos serem mais soroprotegidos, pode estar relacionado à anticorpos colostrais ou associação destes com anticorpos de primo-infecção. Assim, faz-se necessário o controle da enfermidade com o acompanhamento sorológico, em animais adultos, para a identificação daqueles com baixos títulos de anticorpos, expostos à condição de risco (Mahoney & Ross 1972, Mahoney 1975).

Na mesorregião Norte Fluminense do estado do Rio de Janeiro as análises quanto a aptidão zootécnica e quanto ao sexo demonstraram não haver diferença estatística significativa na prevalência de anticorpos. Sendo, portanto, a infecção por B. bovis alta, enzoótica e em equilíbrio, entre os grupos analisados. Estas observações sugerem que estes parâ-metros não interferem epidemiologicamente na prevalência do hemoprotozoário nesta mesorregião.

Prevalências maiores ou iguais a 75% de soropositivos significam que os animais se infectam antes de um ano de idade com posteriores infecções e, um número mínimo de animais adultos pode apresentar babesiose clínica (Mahoney & Ross 1972, Madruga et al. 1984b). Assim, a diferença estatística observada na mesorregião Norte Fluminense, quanto a prevalência de positivos anti B. bovis, implica inferir que em alguns municípios desta área (Fig. 1) os animais estão mais expostos à condição de risco na ocorrência de surtos de babesiose, pois a infecção por B. bovis em bovinos não é homogênea entre os municípios. Entretanto, este risco é mínimo; exceto, quando há introdução de animais provenientes de áreas livres ou de áreas instáveis enzooticamente. Nesta situação, é necessário a imunização de animais importados oriundos dessas áreas. O conhecimento dos níveis de anticorpos, anti B. bovis, em bezerros nesta mesorregião elucidaria a origem dos anticorpos e auxiliaria na compreensão do perfil imunológico do rebanho.

Estima-se que aproximadamente 130 milhões de bovinos estão sujeitos à infecção por B. bovis e por B. bigemina e que a maior parte do território brasileiro está sob condição de estabilidade enzoótica (MARA 1985, Patarroyo et al. 1987, Leite et al. 1989, Linhares et al. 1992). A distribuição de Babesia spp., parasita de bovinos, está associada à presença do carrapato B. microplus e a prevalência é elevada em algumas regiões do país (Valente & Amaral 1971, Madruga et al. 1984a,b, Alves 1987). No entanto, mesmo em regiões com estabilidade enzoótica a infecção por B. bovis é considerada como causa de doença e mortalidade em bezerros (Valente & Amaral 1971, Ribeiro et al. 1983, Madruga et al. 1984a).

Os resultados obtidos não diferem de outros estados do país, onde a infecção por B. bovis é alta independente de fatores etário, sexual e racial; embora, no presente trabalho tenha havido diferença entre as idades analisadas. Poucas regiões do Brasil possui situação de instabilidade para B. bovis, como em Pernambuco onde a prevalência é de 27,80% (Alves 1987). No estado de Goiás foi observado a prevalência de anticorpos de 98,72% (Linhares et al. 1992), na Bahia foi de 95,30% (Araújo et al. 1998) e no estado de Minas Gerais a prevalência de anticorpos anti B. bovis foi de 82,50% (Patarroyo et al. 1987), análises determinadas pela prova de IF indireta.

Em um estudo comparativo entre as técnicas ELISA indireto, IF indireto e o teste de conglutinação rápida, para detecção de anticorpos anti B. bovis, conduzido com 462 bovinos de quatro microrregiões do estado da Bahia, observou-se ser ELISA o teste mais eficiente (Araújo et al. 1998). Böse et al. (1990) verificaram que ELISA e a prova mais indicada no diagnóstico sorológico, de rebanhos, para B. bovis, mesmo utilizando antígenos brutos. Esta técnica é ainda recomendada para uso em áreas estáveis como também em áreas instáveis enzooticamente (Madruga et al. 1997).

O teste ELISA indireto utilizado mostrou-se adequado na detecção e diferenciação dos níveis de anticorpos anti B. bovis em bovinos da mesorregião estudada, podendo o mesmo ser indicado para outras regiões e situações epidemiológicas.

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