Universidade Federal do Espírito Santo Centro de Ciências Agrárias Programa de Pós-graduação em Produção Vegetal

ISOLAMENTO DE PROTOPLASTOS
Alunas: Anelise Marques
Angélica Nogueira Micheli Spadeto Alegre – ES 2012

INTRODUÇÃO
• A diferença fundamental entre células de plantas e a dos animais é que as células de plantas são totipotentes e podem se dividir e desenvolver em plantas completas;
• Plantas apresentam também uma parede celular rígida constituída por: celulose, hemicelulose e pectina.

INTRODUÇÃO
• A parede celular -> é o maior impedimento na transferência direta de DNA para células individuais e na produção de híbridos somáticos pela fusão de células;
• Pode ser removida temporariamente de células de plantas sem …exibir mais conteúdo…

ETAPAS DE ISOLAMENTO DOS PROTOPLASTOS
 Desinfestação dos explantes
• Quando são utilizados plantas mantidas in vitro, os tecidos devem ser Desinfestação: desinfestados previamente; cálcio a 2% (p/v) ou hipoclorito de sódio a • solução de hipoclorito de 0,5 a cultivadas in vitro diluída) por 5 a 20min; • As plantas1% (água sanitária são desinfestadas com mais cuidado; • Com ou sem agitação; • Plântulas in vitro são preferidas como fonte de protoplastos, devido suas • Lavagem 3x com água destilada autoclavada; vantagens conferidashipoclorito,condições modo de desinfestação • Concentração de pelas tempo e o assépticas e controle do ambiente; com o tipo e idade do tecido. variam

ETAPAS DE ISOLAMENTO DOS PROTOPLASTOS
 Estado fisiológico
• Condições para divisão celular de protoplastos: • Umidade

• Temperatura
• Fotoperíodo • Intensidade luminosa

controle

• O fator mais importante é o estado fisiológico da planta doadora. As células devem mostrar alta atividade fisiológica com alta taxa de divisão.

ETAPAS DE ISOLAMENTO DOS PROTOPLASTOS
 Degradação da